二分子相補アフィニティ精製（BiCAP）により、ERBB2二量体の二量体特異的タンパク質相互作用が明らかに

Sci. Signal. 12 Jul 2016:
Vol. 9, Issue 436, pp. ra69
DOI: 10.1126/scisignal.aaf0793

David R. Croucher^1,2,3,*, Mary Iconomou^1,†, Jordan F. Hastings^1,†, Sean P. Kennedy^1,4,†, Jeremy Z. R. Han¹, Robert F. Shearer¹, Jessie McKenna¹, Adrian Wan⁵, Joseph Lau⁵, Samuel Aparicio^5,6, and Darren N. Saunders^1,7,*

¹ The Kinghorn Cancer Centre, Garvan Institute of Medical Research, Sydney, New South Wales 2010, Australia.
² St. Vincent's Hospital Clinical School, University of New South Wales, Sydney, New South Wales 2052, Australia.
³ School of Medicine, University College Dublin, Belfield, Dublin D4, Ireland.
⁴ Systems Biology Ireland, University College Dublin, Belfield, Dublin D4, Ireland.
⁵ Department of Molecular Oncology, British Columbia Cancer Research Centre, Vancouver, British Columbia V5Z 1L3, Canada.
⁶ Department of Pathology and Laboratory Medicine, University of British Columbia, Vancouver, British Columbia V6T 1Z4, Canada.
⁷ School of Medical Sciences, University of New South Wales, Sydney, New South Wales 2052, Australia.

* Corresponding author. Email: d.croucher@garvan.org.au (D.R.C.); d.saunders@unsw.edu.au (D.N.S.)

^† These authors contributed equally to this work.

要約

多タンパク質複合体の動的アセンブリは、多くの細胞シグナル伝達経路の中心的機序である。この過程は、急速に変化する細胞状態に対する、正確であるが、適応性のある反応に必要な時空間的特異性を維持する鍵である。本稿では、個々の構成部分や競合結合パートナーではない、2つの相互作用タンパク質の特異的単離および下流のプロテオーム特性評価の手法について述べる。この手法は構造特異的ナノ抗体の使用とアフィニティ精製を含むタンパク質断片相補アッセイを組み合わせたものであるため、われわれは二分子相補アフィニティ精製（BiCAP）と呼んでいる。本研究では、BiCAPを用いて、ホモ二量体またはEGFRもしくはERBB3とのヘテロ二量体としての上皮成長因子受容体（EGFR）ファミリーメンバーERBB2の特異的インタラクトームを明らかにした。また、主要なアダプタータンパク質について、二量体特異的パターンを特定し、これまで知られていなかった多数の相互作用パートナーを特定した。これらの新たに同定されたパートナーの一つの機能解析から、ERBB2:ERBB3ヘテロ二量体に特異的で、乳がん細胞中のアダプタータンパク質FAM59Aを介して作用する細胞外シグナル調節キナーゼ（ERK）活性化の非標準メカニズムが明らかになった。

Citation: D. R. Croucher, M. Iconomou, J. F. Hastings, S. P. Kennedy, J. Z. R. Han, R. F. Shearer, J. McKenna, A. Wan, J. Lau, S. Aparicio, D. N. Saunders, Bimolecular complementation affinity purification (BiCAP) reveals dimer-specific protein interactions for ERBB2 dimers. Sci. Signal. 9, ra69 (2016).