インテグリン会合複合体のプロテオミクス分析による、Rac1およびArf6の二重調節因子としてのRCC2の同定

Sci. Signal., 8 September 2009
Vol. 2, Issue 87, p. ra51
[DOI: 10.1126/scisignal.2000396]

Jonathan D. Humphries^1,2*, Adam Byron^1,2*, Mark D. Bass^1,2, Sue E. Craig^1,2, John W. Pinney^2†, David Knight², and Martin J. Humphries^1,2‡

¹ Wellcome Trust Centre for Cell-Matrix Research, University of Manchester, Manchester M13 9PT, UK.
² Faculty of Life Sciences, University of Manchester, Manchester M13 9PT, UK.

* These authors contributed equally to this work.

† Present address: Centre for Bioinformatics, Division of Molecular Biosciences, Imperial College London, London SW7 2AZ, UK.

‡ To whom correspondence should be addressed. E-mail: martin.humphries@manchester.ac.uk

要約  インテグリン接着受容体が細胞外マトリックスのリガンドに結合することによって、さまざまな発達、恒常性および疾患の過程において、細胞の形態、運動、生存および分化が制御される。今回我々は、インテグリン接着受容体と会合する複合体を単離する方法論について報告する。これらの複合体は、他の受容体会合シグナル伝達複合体と同様に、プロテオミクス解析が困難であった。2組の受容体とリガンド、すなわちα₄β₁-血管細胞接着分子-1およびα₅β₁-フィブロネクチンのプロテオームを定量比較解析することによって、コア成分および受容体に特異的な成分が定義された。染色体凝縮制御因子-2（RCC2）は、α₅β₁-フィブロネクチンシグナル伝達ネットワークにおいて、Rac1およびADPリボシル化因子6（Arf6）サブネットワークの共通部分に検出された。RCC2のノックダウンによって、フィブロネクチンが誘導するRac1およびArf6の活性化が亢進し、細胞の延展が促進されたことから、RCC2が膜の突起伸長および供給に必要なシグナル伝達を制限することが示唆された。RCC2ノックダウンによるRac1およびArf6機能の調節不全によって、フィブロネクチン繊維に沿った持続的な細胞の移動も消失したことから、方向性のある細胞運動においてRCC2が機能的役割を果たすことが示された。このプロテオミクスワークフローは、接着シグナル伝達のさらなる精査およびシステムレベルでの解析への道を開くものである。