固定した中枢神経切片の変性ニューロンを銀染色検出 FD NeuroSilver™ Kit II

FD NeuroSilver™ キットは、固定した中枢神経系の組織切片中の変性ニューロンを、高特異的かつ高感度に検出するキットです。リソソーム、軸索、神経末端などは変性していく過程で、銀との親和性が高くなる知見に基づいています。最後に還元処理を行うことにより、組織中の銀イオンが顆粒となり、光学顕微鏡や電子顕微鏡で観察ができるようになります。

本製品を用いることで、トランスジェニックマウス脳のアミロイド斑および免疫組織化学に基づいて作成された組織切片における神経変性等を検証することができます。

• FD NeuroSilver™ Kit II の引用文献一覧はこちら をご参照ください。

FD NeuroSilver™ Kit II は、様々な条件下で、動物を用いた研究に広く使用されています（引用文献一覧を参照）。脳および脊髄において、変性ニューロンの細胞体、軸索、軸索末端を、高感度かつ特異的に検出することが示されており（使用例を参照）、特に、一般的な病理組織診断で確認できない少数の変性ニューロンの検出に有用です。

また、本キットは、トランスジェニックマウス脳において、アミロイド斑を非常に高感度に検出することが示されています（使用例を参照）。さらに、免疫組織化学染色用に作製された組織切片に使用し、神経変性やアミロイド斑を検出することもできます（使用例を参照）。
本キットは、約1時間で染色が可能です。

その他必要な試薬・機器・器材

1. 蒸留（2回）水 または Milli-Q 水
2. 6ウェル 組織培養プレート
3. （オプション） Corning® Netwells® inserts（Corning 品番： #3480）、carrier kit（Corning 品番： #3521）
4. 必要な機器・器材
   • ゼラチンコート顕微鏡スライド
   • カバーガラス
   • 染色瓶
   • キシレン
   • Permount®
   • 光学顕微鏡

Corning® および Netwells® は、Corning, Inc. の登録商標です。
Permount® は、Fisher Scientific 社の登録商標です。

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図1. FD NeuroSilver™ Kit I を用いた神経変性の検出
A： カイニン酸（10 mg/kg、皮下注射）を投与したラットの海馬歯状回の切片（40 µm）。多形層（pl）、分子層（ml）の、変性したニューロンと突起を示す（黒）。
B： 海馬采の片側を切断して 10日後のラット中隔の冠状切片（30 µm）。同側脳弓において変性した軸索が観察される（矢印）。
C： アミノオキシ酢酸を嗅内皮質投与して5日後のラット海馬歯状回の水平切片（40 µm）。分子層（ml）の中間帯に変性した軸索末端（薬剤投与により死滅した嗅内皮質ニューロンの末端）が多く存在する（詳細は Neuroscience 82:1165, 1998 を参照）。
D： 視覚野を一側性に吸引除去して5日後のラット外側膝状核の冠状切片（40 µm）。subgeniculate nucleus（SubG）で変性した軸索末端が高密度に観察される。
切片のご提供： Dr. E.-Y. Chen, Rush University (D)

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図2. 脳卒中モデルラット脳における神経変性の検出
脳卒中モデルラット脳の線条体を冠状に切断し、40μm の凍結切片を作製した。FD NeuroSilver™ Kit I を用いてニューロンの損傷を検出した。線条体と皮質の両方に銀粒子（黒）が蓄積し、神経変性を示した。

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図3. てんかんモデルラット脳における神経変性の検出
てんかんモデルラット脳の皮質の凍結切片（40 µm）。深層において変性ニューロン（黒）が観察される。

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