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固定と透過処置に最適フローサイトメトリー用 FIX&PERM® キット

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メーカー名：Nordic-MUbio BV

FIX&PERM®キットは、細胞内構造をフローサイトメトリーで解析する際の固定と透過処置に最適です。
2種類の試薬（Reagent A：固定用、Reagent B：透過処理用）を使用する、簡単な手順のキットです。

背景

フローサイトメトリーは、細胞内の構成成分（細胞質／核内酵素／オンコプロテイン／サイトカイン／イムノグロブリンなど）を除いた細胞表面の分子を、モノクローナル抗体を用いて解析する方法です。また、従来のフローサイトメトリーでは、未分化白血病のマーカーとして細胞質に存在するCD3、CD22などは、解析することができません。

FIX&PERM® キットを使用すると、細胞内および細胞表面のマーカーを同時に解析することができます。また、本キットには、多くの標識されたモノクローナル抗体を用いることができます（固定ステップの最適化が必要となる場合があります）。

使用目的

細胞内構造をフローサイトメトリー解析する際の固定と透過処置に最適です。
白血病やリンパ腫の免疫表現型検査に適しています。
優れたスキャッターデータが得られます。
迅速、簡単、お手ごろ価格のキットです。

構成内容

Reagent A：固定用試薬
Reagent B：透過処理用試薬

原理・プロトコール

（クリックで拡大されます）

プロトコール

各サンプル（全血、骨髄細胞／単核細胞浮遊液）50μL を、5mL チューブに入れる
Reagent A（固定用試薬、室温で保存／使用）100μL を添加する
室温で15分間インキュベートする
PBS 5mL を添加し、300 g × 5分間遠心する
上清を除去し、細胞ペレットに Reagent B（透過処理用試薬）100μL と、適切な標識モノクローナル抗体 20μL を添加する
低速で 1-2 分間ボルテックスする
室温で15分間インキュベートする
PBS 5mL を添加し、300 g × 5分間遠心する
上清を除去し、すぐに解析する場合は、細胞をシース液に再懸濁する
または、細胞を 1.0 ％ホルムアルデヒド 0.5mL に再懸濁して暗所 2-8℃ に保存し、24時間以内に解析する。

使用例

図1：NOR CD22-PE標識を用いてB-ALL型未分化白血病細胞の細胞質を染色した。

図2：NOR CD3-PE標識のネガティブを用いてB-ALL型未分化白血病細胞の細胞質を染色した。

図3：NOR MPO-FITC標識を用いてAML型未分化白血病細胞の細胞質を染色した。

フローサイトメトリー用 FIX&PERM® キット

品名	メーカー	品番	包装	希望販売価格
FIX&PERM^(R) Cell Fixation and Permeabilization Kit	NOR	GAS-002	8*5 ML	￥68,000
FIX&PERM^(R) Kit 1000	NOR	GAS-002-1	2*100 ML	￥225,000
FIX&PERM^(R) Sample Kit	NOR	GAS-002M	2*5 ML	￥20,000

【単品】 Fix&PERM® Reagent A（固定用試薬）

品名	メーカー	品番	包装	希望販売価格
FIX&PERM^(R) Solution A (Fix)	NOR	GAS-002A-1	100 ML [1 x 100 ml]	￥119,000

【単品】 Fix&PERM® Reagent B（透過処理用試薬）

品名	メーカー	品番	包装	希望販売価格
FIX&PERM^(R) Solution B (Perm)	NOR	GAS-002B-1	100 ML [1 x 100 ml]	￥119,000

【関連商品】

白血球をモノクローナル抗体で染色した後に赤血球を溶解する試薬です。様々なサンプル（血液・骨髄）のフローサイトメトリー解析に最適です。

品名	メーカー	品番	包装	希望販売価格
NM-LYSE: Flow Cytometry Lysing Solution	NOR	GAS-003	30 ML [300 Tests]	￥38,000
NM-LYSE: Flow Cytometry Lysing Solution	NOR	GAS-003-1	100 ML [1000 Tests]	￥116,000

参考文献

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