記事ID ： 3111

ALPを抗体やタンパク質に結合 Dojindo Labeling Kit シリーズ ‐ アルカリホスファターゼ標識キット

アルカリホスファターゼ標識キットは、NHS基やマレイミド基で活性化したALPを、タンパク質のアミノ基（NH₂）やチオール基（SH基）に標識するためのキットです。得られたALP標識タンパク質は、免疫組織染色、ELISA、ウェスタンブロッティング等にそのまま用いることができます。

標識操作は精製抗体を用いて行ってください。抗体の精製には、同社(DMT)のIgG精製キットが便利です。

背景

アルカリホスファターゼ(ALP)は、ペルオキシダーゼと並び、免疫染色法やELISAに汎用されている酵素です。化学発光を利用した検出法は感度に優れており、特にブロッティングや組織染色に広く利用されています。

＊ALK：Alkaline Phosphatase Labeling Kit

NH₂標識

SH標識

＜実験例1＞ELISA
ELISAプレートに固定化したBiotin標識BSAを、各種方法でALP標識した抗ビオチン抗体を用いて検出した。

Alkaline Phosphatase Labeling Kit - NH₂(ALK-NH₂)、Alkaline Phosphatase Labeling Kit - SH(ALK-SH)、および他社品Kitを用いて作製したALP標識抗ビオチン抗体を用いたELISA

＜実験例2＞ウエスタンブロット
抗原タンパク質をSDS-PAGEで泳動した後、ニトロセルロース膜に転写し、Alkaline Phosphatase Labeling Kit - NH₂で作製したALP標識抗体を用いて検出した。

ALP標識一次抗体を用いたウェスタンブロット。ALP標識一次抗体の25,000倍希釈液で染色し、ALP発光基質(Bold APB chemiluminescent substrate, Molecular Probes)を反応させ、 20秒間露光した。

品名	メーカー	品番	包装	希望販売価格
アルカリフォスファターゼ標識用キット (NH2基） / Alkaline Phosphatase Labeling Kit - NH2	DMT	LK12	3 PREP.	￥27,800
アルカリフォスファターゼ標識用キット (SH基） / Alkaline Phosphatase Labeling Kit - SH	DMT	LK13	3 PREP.	￥27,800