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HRPを抗体やタンパク質に結合 Dojindo Labeling Kit シリーズ ‐ ペルオキシダーゼ標識キット

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ペルオキシダーゼ標識キットは、NHS基やマレイミド基で活性化したHRPをタンパク質のアミノ基やチオール基に標識するためのキットです。

得られたHRP標識タンパク質は、免疫組織染色、ELISA、ウェスタンブロッティング等にそのまま用いることができます。標識操作は精製抗体を用いて行ってください。抗体の精製には、同社(DMT)のIgG精製キットが便利です。

Dojindo Labeling Kit シリーズ
3時間以内でタンパク質標識が可能
Dojindo Ab-10 Rapid Labeling Kit シリーズ
10 μg の抗体を 30 分以内に標識

背景

ペルオキシダーゼは、酵素免疫法（EIA）や組織染色等に利用される最も一般的な酵素として知られています。多くのペルオキシダーゼ標識体が市販され利用されていますが、研究の多様性から、研究者が自ら標識体を調製するケースが増えてきています。ペルオキシダーゼを標識する方法はいくつか知られていますが、いずれも煩雑で、時間や経験を要します。

構成内容

NH₂標識
●NH₂-Reactive Peroxidase
●Reaction Buffer
●Storage Buffer
●Filtration Tube

SH標識
●SH-Reactive Peroxidase
●Reducing Agent
●Reaction Buffer
●Solution A
●Solution B
●Storage Buffer
●Filtration Tube

**各種ペルオキシターゼ標識法の特性**
	NH₂標識			SH標識
	PLK-NH₂	過ヨウ素酸法	グルタル酸法	PLK-SH	他社マレイミド法
操作時間	3時間	48時間	48時間	3時間	48時間
操作性	◎	×	×	◎	×
透析/カラム精製	なし	あり	あり	なし	あり
標識効率	○	△	×	○	○
標識体の回収率	○	△	△	○	△

＊PLK：Peroxidase Labeling Kit

実験例

＜実験例1＞ELISA
ELISAプレートに固定化したBiotin標識BSAを、各種方法でHRP標識した抗ビオチン抗体を用いて検出した。

Peroxidase Labeling Kit - NH₂(PLK-NH₂)、PeroxidaseLabeling Kit - SH(PLK-SH)、および他社品Kitを用いて作製したHRP標識抗ビオチン抗体を用いたELISA

＜実験例2＞ウエスタンブロット
リン酸化チロシンBSAをSDS-PAGEで泳動した後、ニトロセルロース膜に転写し、Peroxidase Labeling Kit - NH₂ (PLK-NH₂)で作製したHRP標識抗リン酸化チロシン抗体を用いて検出した。2次抗体を用いた間接法に比べ、より高感度な検出が可能であった。

リン酸化チロシンBSAのウエスタンブロット(それぞれTMB発色)
a) PLK - NH₂を用いて標識したHRP標識抗リン酸化チロシン抗体で検出(直接法)
b) 抗リン酸化チロシン抗体/HRP標識2次抗体で検出(間接法)

ペルオキシダーゼ標識キット

品名	メーカー	品番	包装	希望販売価格
ペルオキシダーゼ標識用キット (NH2基） / Peroxidase Labeling Kit - NH2	DMT	LK11	3 PREP.	￥22,800
ペルオキシダーゼ標識用キット (SH基） / Peroxidase Labeling Kit - SH	DMT	LK09	3 PREP.	￥22,800
ペルオキシダーゼ標識用キット (NH2基） / Peroxidase Labeling Kit - NH2(for 1mg)	DMT	LK51	1 PREP.	￥39,800