ルーティーンのPCRに、従来のTaq より高速 Bioneer社 Top DNA ポリメラーゼ

Top DNAポリメラーゼは、Taq DNAポリメラーゼより高速の熱耐性のPCRポリメラーゼです。実際に、Top DNAポリメラーゼの伸長速度は、Taq DNAポリメラーゼの3倍です。Top DNAポリメラーゼは、様々なPCR増幅（TAクローニングを含む）に使用でき、日常的なPCRのための強力な酵素です。プルーフリーディング活性又は5'-3'エキソヌクレアーゼ活性を含みません。

Bioneer社　DNAポリメラーゼ酵素選択ガイド

無料サンプルをご用意しております！
サンプルのお申込みは こちら（WEBフォーム） から
*無料サンプルは1研究室あたり1点のみです。

• 迅速：標準的なTaq DNAポリメラーゼに比べて3倍の伸長速度
• 高性能：最大10kbまで増幅可能
• 経済的：格安、無償サンプルもご用意してます！

• 5' - 3' エキソヌクレアーゼ活性： No
• 3' - 5' エキソヌクレアーゼ活性： No
• 3' – A オーバーハング： Yes
• フラグメントサイズ：最大 10 kb

• スタンダードPCR（最大10kb）
• プライマー伸長
• TAクローニング
• 遺伝子シーケンシング

図1　ラムダゲノムDNAを用いたTop DNAポリメラーゼ及びTaq DNAポリメラーゼの感度テスト
段階希釈したラムダゲノムフラグメント（1反応あたり 100ng〜10fg DNA）を用い、1UのDNAポリメラーゼで増幅した。
レーンMV：1kb DNA ラダー（品番：D-1040）
DNA量：
レーン1：100ng、レーン2：10ng、レーン3：1ng、レーン4：100pg、レーン5：10pg、レーン6：1pg、レーン7：100fg、レーン8：10fg

図2　バクテリア及びヒトゲノムDNAを用いたTop DNAポリメラーゼ及びTaq DNAポリメラーゼの感度テスト
500bpのバクテリアゲノムDNA及び220bpのヒトゲノムDNAを段階希釈し、1UのDNAポリメラーゼで増幅した。
レーンMV：100b plus DNA ラダー（品番：D-1035）
レーン1〜4：バクテリアゲノムDNA、レーン5〜8：ヒトゲノムDNA
レーン1：1ng、レーン2：100pg、レーン3：10pg、レーン4：1pg、レーン5：10ng、レーン6：1ng、レーン7：100pg、レーン8：10pg

図3　Top DNAポリメラーゼ及びTaq DNAポリメラーゼの酵素活性テスト
DNAポリメラーゼを段階希釈し、20ngのラムダDNA（左）及びヒトゲノムDNA（右）を増幅させた。
レーンMV：100b plus DNA ラダー（品番：D-1035）
使用酵素：
レーン1〜4：Top DNAポリメラーゼ、レーン5〜8：Taq DNAポリメラーゼ
酵素量：
レーン1、5：1U、レーン2、6：0.5U、レーン3、7：0.33U、レーン4、8：0.25U

図4　Top DNAポリメラーゼ及びTaq DNAポリメラーゼの長いターゲットに対するPCR増幅
10ngのラムダDNAを1UのDNAポリメラーゼで増幅させた。
レーンM1：1kb DNAラダー（品番：D-1040）、レーンM2：ラムダDNA/Hind IIIマーカー（品番：D-1050）
レーン1：2kb、レーン2：3kb、レーン3：4kb、レーン4：5kb、レーン5：6kb、レーン6：7kb、レーン7：8kb、レーン8：9kb、レーン9：10kb

図5　Top DNA PolymeraseのSYBR® Green及びリアルタイムqPCRを用いた感度テスト
スタンダードカーブは、R2=0.9993の高い相関係数を示した。

* サンプルをご用意しております。お気軽にご照会ください。

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