遊走・浸潤を高い再現性でリアルタイムに観察 細胞遊走アッセイ（BioGel様式）

細胞遊走BioGelアッセイは、細胞培養プレート上に細胞の無い検出領域を作り出すためにウェル中央が無毒の生体適合性ゲル（BioGel）によって覆われています。細胞をプレートへ播種した後、BioGelが溶解され、ウェルの中央に細胞が遊走します。

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• 複数の蛍光プローブやラベル、比色染色によって処理をした細胞を、倒立顕微鏡やHigh Content Screening（HCS）、High Content Imaging（HCI）で測定できます。
• 生体適合性ゲルが自動的に溶解されて検出領域が露出するアッセイフォーマットにより、アッセイ操作時間を削減しました。
• ハイスループットなアッセイにも便利な96ウェルプレート。
• 再現性の高い結果が得られます（ウェル間でのCVは12％以下）。化合物スクリーニングに適した安定したZ値を示します。
• リアルタイムなアッセイが可能。
• Cell migration BioGel assay and invasion assay, Collagen-I coated（品番：ENZ-KIT110-0001）では浸潤アッセイも可能です。

Cell migration BioGel assay, TC (品番： ENZ-KIT109-0001)
・細胞遊走BioGel HTアッセイ96プレート（組織培養処理：コーティングなし）

Cell migration BioGel assay and invasion assay, Collagen-I coated (品番：ENZ-KIT110-0001)
・細胞細胞遊走BioGelアッセイ
・細胞浸潤アッセイ96ウェルプレート（コラーゲンI コーティング）
※コラーゲンI は別売りです。

Cell migration BioGel HT assay, TC（品番：ENZ-KIT111-0001／ENZ-KIT111-0005） 
・細胞遊走BioGel HTアッセイ384プレート（組織培養処理：コーティングなし）

Cell migration BioGel HT assay, Collagen-I coated (品番：ENZ-KIT112-0001／ENZ-KIT112-0005)
・細胞遊走BioGel HTアッセイ384プレート（コラーゲンI コーティング）

図1．蛍光顕微鏡による細胞遊走アッセイ（品番：ENZ-KIT110-0001）の結果。二つのプレートのウェルにHT-1080細胞をそれぞれ 30,000 cells　播種し、1時間（37℃，5% CO2）インキュベートした。1時間後、一つのプレートをインキュベーターから取り出して固定化し、FアクチンをTRITC-ファロイジンにより染色。もう一方のプレートは細胞遊走させるためにさらに18時間インキュベートした後に、同様に蛍光染色した。図１は蛍光顕微鏡により観察した遊走前（t=0時間）と遊走後（t=18時間）のウェルを比較したデータを示す（CV=5.57%，Δmigratiion and Z' = 0.60 for migration）。スケールバー=500μm。

図2．ソラフェニブによるHUVEC細胞遊走（品番：ENZ-KIT112）の阻害結果。プレートにHUVEC細胞4,500 cells/well を播種し、RAF/MEK/ERK経路の阻害剤であるソラフェニブを用いて容量反応滴定を行った。細胞を16時時間処理した後に固定化し、TRITC-ファロイジンを用いてFアクチンを染色。図2は蛍光顕微鏡により観察したBioGel（BCG）のウェル、遊走前、コントロール、ソラフェニブ濃度の異なる遊走後（t=16時間）のウェルの結果を示す（Z’=0.68 for migration*; n=4 wells/condition） 。 算出されたIC50は21.5 mM。

*Reference: Zhang JH, Chung TD, Oldenburg KR, “A Simple Statistical Parameter for Use in Evaluation and Validation of High Throughput Screening Assays.” J Biomol Screen. 1999; 4(2):67-73

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