記事ID ： 13077

生体試料のヒストン脱アセチル化酵素活性を測定 COLOR DE LYS® HDAC アッセイ（比色）

メーカー名：Enzo Life Sciences,Inc.

COLOR DE LYS® アッセイは、組織・細胞・核抽出物中、免疫沈降物もしくは精製酵素中の HDAC 活性を測定するようにデザインされています。

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特長

アッセイ原理	キットの特長
	1時間以内に結果がわかる簡単な2ステッププロトコール多くのプレートリーダーに互換性がある 405 nm 波長で比色の読み出し抗体ベースのアッセイに共通する洗浄剤干渉に耐性放射線、抽出、クロマトグラフィーは必要なしハイスループットアッセイに最適

構成内容

構成内容	単品販売品番
HeLa細胞核抽出物（ポジティブコントロール）	BML-KI137-0500
COLOR DE LYS® 脱アセチル化酵素基質	BML-KI138-0050
COLOR DE LYS® Developer 濃縮	BML-KI139-0300
トリスタチンA（HDAC阻害剤）	BML-GR309-0001 BML-GR309-0005
COLOR DE LYS® 脱アセチル化スタンダード	BML-KI141-0030
HDACアッセイバッファー	BML-KI143-0020
1/2容量マイクロプレート	-

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用途

組織・細胞抽出物／免疫沈降物／精製酵素の HDAC 活性をトータルに測定
様々な条件下での HDAC のカイネティクス解析
添付のコントロール HeLa 核抽出物を使った阻害剤活性

サンプル

組織・細胞抽出物／免疫沈降物／精製酵素
HDAC 阻害活性を有する化合物

製品データ

図1 COLOR DE LYS® HDAC Colorimetric Assayは、競合抗体ベースアッセイよりも洗浄剤に低感受性。

図1 COLOR DE LYS® HDAC Colorimetric Assay は、競合抗体ベースアッセイよりも洗浄剤に低感受性
HeLa 核抽出物（8.30）に基質と 0.1% TritonX-100® 入り、無しの製造会社推奨バッファーを加えた。37℃、60分後、反応を停止し、製造会社推奨の過程に進んだ。
Triton X-100® は、COLOR DE LYS® 反応においてわずかもしくは影響がないように見えたが、抗体ベースアッセイでは 70% の阻害が見られた。

HeLa核抽出物による COLOR DE LYS® 脱アセチル化酵素基質の脱アセチル化のトリコスタチンA阻害

図2 HeLa核抽出物による COLOR DE LYS® 脱アセチル化酵素基質の脱アセチル化のトリコスタチンA阻害
HeLa核抽出物（5 µL/well）を、0.2 mM 基質と図に示した濃度のトリコスタチンAと一緒にインキュベート（37℃）した。反応は30分後に COLOR DE LYS® Developer を加えて停止し、吸光度（405nm）を測定した。