記事ID ： 17202

細胞ライセート中の Diacylglycerol を測定 DAG（ジアシルグリセロール）アッセイキット

メーカー名：Cell Biolabs, Inc.

DAG（ジアシルグリセロール）アッセイキットは、2種類の酵素反応系を利用して、細胞ライセート中のジアシルグリセロールを測定するキットです。

背景

DAG（ジアシルグリセロール）とは

ジアシルグリセロール（DAG）は、グリセリンに2つの脂肪酸が結合したグリセリドです。トリグリセリドやリン脂質などの脂質の前駆体で、細胞のシグナル伝達におけるセカンドメッセンジャーとして機能します。ホスホリパーゼCによる PIP2 の加水分解により生成され、細胞内 Ca²⁺ の放出と PKC の活性化を引き起こします。活性化された PKC 酵素は、様々な基質と相互作用し、細胞生理機能に影響を与えます。

構成内容

DAG スタンダード
10X アッセイバッファー
キナーゼミクスチャー
リパーゼ溶液
酵素ミクスチャー
蛍光プローブ

原理

まず、キナーゼによりサンプル中のDAGがリン酸化されると、ホスファチジン酸が生成されます。次に、リパーゼにより、ホスファチジン酸がグリセロール-3-リン酸に加水分解されます。その後、グリセロール-3-リン酸オキシダーゼによりグリセロール-3-リン酸が酸化され、過酸化水素が生成されます。この反応で放出された過酸化水素は、本キットに含まれる蛍光プローブと特異的に反応し、励起 530-560 nm / 蛍光 585-595 nm で検出されます。サンプル中のDAG量を、DAGスタンダードカーブに基づいて決定します。