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New-generation RACE　cDNA合成からRACEまで1日で実施可能 (株)エルプレイン研究所（ELP）社: accura-expRACE KIT

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メーカー名：株式会社エルプレイン研究所

本キットで使用のシングルプライマー法*によるRACE (Rapid Amplification of cDNA Ends)は、ds cDNAを鋳型に用いてターゲットcDNAをただ1種類の遺伝子特異的プライマーによるPCRで増幅します。（下図を参照）
そのメカニズムは、伸長反応時(68℃)における遺伝子特異的プライマーを含む2本鎖DNA末端領域の部分変性と、線状DNA分子の環状化傾向に基づいています。

鋳型DNA鎖の5’末端まで合成を終えた熱安定性DNAポリメラーゼが、その触媒部位へ侵入した娘鎖の5’末端領域に乗り換え(template-switching)を起こして遺伝子特異的プライマーに相補的な塩基配列を3’末端に持つ娘鎖DNAを合成します。
これが鋳型になって1種類の遺伝子特異的プライマーのみでターゲットcDNAが効率的に増幅されます。

*特許第4304350号
U.S. patent #7504240

特長

RT-PCRのように簡単な条件設定でRACE PCRを行うことができます。
accura-expRACE KITは正確・高効率に5’および3’RACEを行うことが可能で長いcDNAが得られます。また稀少なcDNAを単離することが可能です。
作製したds cDNAはライブラリーとして使用することができて、RACEによる約400回のスクリーニングが可能です。
改良型M-MLV逆転写酵素を使用しているので全長cDNAが高い比率で含まれています。