inGenious社の独自技術であるF.A.S.T.™ (Flexible Accelerated STOP TetO) は、Cre-loxP、FLP-FRT および Tetシステムを組み合わせて、一度の遺伝子ターゲティングにより、5種類の制御可能で多目的なモデルマウスを得ることができ、非常に汎用性の高いツールであることが科学的に実証されています。
F.A.S.T.™ システムでは STOP-tetO ノックインマウスとtetO ノックインマウスから 5 種類の遺伝子操作モデルを作製可能です (Fig. A)。
まずES細胞の目的遺伝子の翻訳開始部位のすぐ上流に 「loxP-FRT-Neo-STOP-FRT-TetO-loxP」 カセットを挿入することで、ノックアウト表現型を得ます (STOP-tetO ノックインマウス、Fig B)。
このマウスにフリッパーゼ (FLP) 発現または一過性発現マウスを交配することで STOP が除かれ、野生型と同様の発現パターンを示す tetO ノックインマウスを得ることができます (Fig C)。 この2つのノックインマウス （STOP-tetOとtetOマウス） に、さらにCreリコンビナーゼマウス、tTAマウス、または tTSマウスを交配することで、5種類の遺伝子操作モデルを得ることができます (Fig. A, Phenotype 2)。またドキシサイクリン (Dox) の投与により、遺伝子発現を可逆的に制御することが可能です (Fig. A, Phenotype 3)。
用語説明
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Baudouin SJ et al. (2012) Shared synaptic pathophysiology in syndromic and nonsyndromic rodent models of autism. Science 338(6103): 128-132.
Tanaka KF et al. (2010) Flexible Accelerated STOP Tetracycline Operator-knockin (FAST): a versatile and efficient new gene modulating system. Biol Psychiatry 67(8): 770-773.
Schönig K et al. (2010) The power of reversibility: regulating gene activities via tetracycline-controlled transcription. Methods Enzymol. 477: 429-453.
Stieger K et al. (2009) In vivo gene regulation using tetracycline-regulatable systems. Adv Drug Deliv Rev 61(7-8): 527-541. Review.
White paper The F.A.S.T.™ Gene Modulating System
Tet Systems: principles and components
Tet Systems: homepage
Schönig K et al. (2010) The power of reversibility: regulating gene activities via tetracycline-controlled transcription. Methods Enzymol. 477: 429-453.
Stieger K et al. (2009) In vivo gene regulation using tetracycline-regulatable systems. Adv Drug Deliv Rev 61(7-8): 527-541. Review.
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＊Cre-loxP システム
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