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記事ID : 17753
研究用

超高感度蛍光基質di-β-D-galactopyranoside(FDG)を用いて大腸菌やその他のグラム陰性細菌を検出・定量します。MarkerGene ™ 大腸菌蛍光検出・定量キット

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大腸菌中のβガラクトシダーゼをコードするlac オペロンは、輸送及び代謝を調節し、培地及び細胞外液中のラクトースやグルコースの濃度によって厳密に調節されています。通常、βガラクトシダーゼはラクトースまたはIPTG誘導の非存在下では基礎レベルでのみ発現しており、検出することが困難です。本キットでは、超高感度蛍光基質di-β-D-galactopyranoside(FDG、図1)を用いて大腸菌や大腸菌群(表1)を検出・定量します。

 di-ß-D-galactopyranoside (FDG) 基質
図1:di-ß-D-galactopyranoside (FDG) 基質

 

表1:β-Galを発現しているバクテリア
Strain Code
Bijidobacterium bifidum     CUETM 89127
CUETM 89/291
CUETM 89/278
CUETM 89/286
ATCC 15696
Bijdobacterium breve   CUETM 89/220
CUETM 89/160
CUETM 90/103 T
Bijidobacterium longum or infantis    CUETM 89/ 157
CUETM 89/ 177
CUETM 89/216
CUETM 89/276
Bifdobacterium longum CUETM 89/11 T
Bijdobacterium infanris CUETM 89/19 T
Bifdobacterium adolescentis CUETM 89/14 T
Bifidobacterium angulatum  CUETM 89/12 T
ATCC 27669
Bifidobacterium catenulatum   CUETM 89/96 T
CUETM 90/ 136
CUETM 89/158
Bifidobacterium dentium    CUETM 89/20 T
ATCC 27679
CUETM 89/141
CUETM 89/219
Bijidobacterium pseudocatenulatum   CUETM 89/16 T
CUETM 89/29
CUETM 89/178
Ruminococcus lactaris ATCC 29176
Ruminococcus gnavus ATCC 29149
Bacteroides fragilis  ATCC 25285
AM2
Lactobacillus sp.  LB4
LB8
Lactobacillus plantarum CIP 7139
Lactobacillus brevis CIP 7135
Zactobacillus acidophilrrs IPL 1627
Clostridium perfringens ATCC 2636
Escherichia coli CIP 54127

検出感度

Detection Sensitivity (CFU)
Assay Incubation Time 0 Hrs 6 Hrs 15 Hrs 19 Hrs
E Coli (Strain W3110) N/A 10^4 10^2 10^0
Induced Wild Type E Coli * (Strain W3110) 10^6 10^3 10^1 10^0
lacI- Constitutive Mutant † (Strain CSH37) 10^4 10^3 10^0 10^0

* These bacteria are grown in culture in the presence of 1mM IPTG to induce lacZ expression.
lacI- Mutants do not produce functional lacZ repressors, and are in a constitutive lacZ expression state

参考文献


  • Favier, C.; Neut, C.; Mizon, C.; Cortot, A.; Colombel, J.-F.; Mizon, J. “Differentiation and identification of human fecal anaerobic bacteria producing β-galactosidase (a new methodology).” Journal of Microbiological Methods (1996), 27(1), 25-31.

  • Journal of Microbiological Methods (1996), 27(1), 25-31. F. Russo-Marie, Roederer, M. Sager, B., Herzenberg, L., “β-Galactosidase Activity in Single Differentiating Bacterial Cells.” Proc. Natl. Acad. Sci. USA 90:8194 (1993).

  • Nelis, H.; Van Poucke, S. “Enzymatic detection of coliforms and Escherichia coli within 4 hours.” Water, Air, and Soil Pollution (2000), 123(1-4): 43-52.

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