記事ID ： 16743

レポーターとして分泌型 Gaussia ルシフェラーゼを使用 GLuc-ON™ 転写応答アッセイ

メーカー名：GeneCopoeia, Inc.

GLuc-ON™ TRE (transcriptional response element：転写応答エレメント) クローンは、哺乳類細胞のシグナル伝達経路を、短時間で高感度に解析するためにご使用いただけます。

レポーターとして分泌型の Gaussia ルシフェラーゼ（GLuc）を用いており、環境刺激や実験操作に応答して、特定のシグナル伝達経路を高感度に活性化します。

各 GLuc-ON™ TRE クローンは、最小限のCMVプロモーターと Gluc 遺伝子の上流に TRE タンデムリピートが含まれ、そのままトランスフェクションすることが可能です。

背景

GLuc-ON™ TRE クローンの原理

GLuc-ON™ TRE 応答エレメントは、GLuc 発現を低いバックグラウンドで強力に活性化します。
GLuc レポーターは分泌型タンパク質なので、細胞を溶解する必要がなく、細胞培養液を用いて短時間で簡単に検出できます。

図1 GLuc-ON TRE クローンの原理

特長

生細胞アッセイ：自然に分泌される GLuc レポーターを用いており、細胞の溶解が不要
リアルタイム検出：リアルタイム活性に近いデータを得ることが可能
ハイスループットに対応

アプリケーション

創薬研究・検証： 目的のシグナル伝達経路を刺激／阻害する低分子化合物の同定
タンパク質やペプチドに対する細胞応答の解析
ホルモンに対する細胞応答の解析
機能ゲノミクス： 遺伝子の活性化、過剰発現、ノックダウン、ノックアウト、突然変異誘発に応答したシグナル伝達経路の生物学的作用の解析（図2）
ウイルス感染： ウイルスに対する細胞応答の解析

アプリケーション例： TREクローンを用いた機能ゲノミクス

図2 アプリケーション例： TREクローンを用いた機能ゲノミクス
HEK293a 細胞に、Oct4 TRE クローン + GFP 発現クローン、ネガティブコントロールクローン + Oct4 発現クローン、Oct4 TRE クローン + Oct4 発現クローンを、コトランスフェクト（同時導入）した。トランスフェクトした細胞を、48時間インキュベートした。Gaussia ルシフェラーゼアッセイを行い、転写応答の活性を luminance（fold activation）で示した。

GLuc-ON™ TRE (transcriptional response element) クローン

品名	メーカー	品番	包装	希望販売価格
CREB TRE clone for cAMP/PKA signaling pathway	GCP	TR100	40 UL [500 ng/μl, 20μg]	￥86,000
NFAT TRE clone for PKC/Ca++ signaling pathway	GCP	TR101	40 UL [500 ng/μl, 20μg]	￥86,000
TCF/LEF TRE clone for Wnt signaling pathway	GCP	TR102	40 UL [500 ng/μl, 20μg]	￥86,000
Oct4 TRE clone for Oct4 signaling pathway	GCP	TR103	40 UL [500 ng/μl, 20μg]	￥86,000
HNF4 TRE clone for HNF4 signaling pathway	GCP	TR104	40 UL [500 ng/μl, 20μg]	￥86,000
JNK TRE clone for SAPK/JNK signaling pathway	GCP	TR105	40 UL [500 ng/μl, 20μg]	￥86,000
PKC TRE clone for PKC/MAPK signaling pathway	GCP	TR106	40 UL [500 ng/μl, 20μg]	￥86,000
EGR1 TRE clone for EGR1 pathway	GCP	TR107	40 UL [500 ng/μl, 20μg]	￥86,000
SRE TRE clone for MAPK/ERK signaling pathway	GCP	TR108	40 UL [500 ng/μl, 20μg]	￥86,000
MEF2 TRE clone for MEF2 signaling pathway	GCP	TR109	40 UL [500 ng/μl, 20μg]	￥86,000
ERSE TRE clone for ER stress pathway	GCP	TR110	40 UL [500 ng/μl, 20μg]	￥86,000
Secreted alkaline phosphatase (SEAP) Expression clone	GCP	SEAP-PA01	1 CLONE [10μg]	￥97,000
TRE negative control clone	GCP	TR001	40 UL [500 ng/μl, 20μg]	￥86,000
GAPDH positive control clone for GLuc-ON^TM Promoter Single Reporter clone	GCP	GAPDH-PG02	1 CLONE [10μg]	￥92,000