記事ID ： 10603

抗体分泌B細胞を高感度に分析 B細胞 ELISpot／FluoroSpot キット

メーカー名：Mabtech AB

抗体を分泌するB細胞の検出は、ELISpot の使用法として最初に記述されたにも関わらず、これまでこの用途のために設計された ELISpot キットはありませんでした。バリデートされた試薬・プロトコールのニーズに応えるために、 Mabtech AB（マブテック／MAB）社では、ヒト、サル、マウスの Ig を分泌する細胞を検出するためのキットのシリーズを開発しました。

B細胞 ELISpot は、抗原特異的B細胞の数を測定する（図1 A、B）ほか、抗体を分泌するトータルの細胞数を測定する（図1 C）ためにも使用できます。抗原特異的測定の場合、抗原を、ELISpot プレートに固定する方法（A）と、検出に使用する方法（B）の2種類があります。前者の方法が専ら使用されてきていましたが、抗原を検出に使用する後者の方法には、感度の向上、抗原必要量の削減など、いくつかの利点があることがわかりました。

ELISpot概要図
図1　ELISpot 概要図

技術情報　B-cell ELISpot

使用目的

B細胞 ELISpot キットは、ELISpot プレート、捕捉用・検出用抗体、B細胞アクチベーター、基質を含み、抗原特異的応答の分析と Ig 分泌トータル細胞の検出の両方に使用できます。
また、B細胞 FluoroSpot キットは、ELISpot キットと同様の感度を持ちますが、異なるアイソタイプの抗体を分泌するB細胞を、同一のウェルで個別に識別することができます。

構成内容

B-cell ELISpot キット

キャプチャー用抗体
ビオチン化検出抗体
ストレプトアビジン-ALP またはストレプトアビジン-HRP
B細胞アクチベーター（R848、ヒトリコンビナント IL-2）*

* 品番 3810-2A と 3810-2H には、CD40 抗体とリコンビナント IL-4 が含まれます。

B-cell FluoroSpot キット

低蛍光 PVDF メンブレンプレート（IPFL）
キャプチャー用抗体
検出用抗体（赤色または緑色のフルオロフォアで標識したもの）
B細胞アクチベーター（R848、ヒトリコンビナント IL-2）
蛍光エンハンサー

表1　B細胞 ELISpot/FluoroSpot キットリスト
種	分析対象	ELISpot Flex キット	FluoroSpot キット
ヒト	IgA	●	-
	IgE	●	-
	IgG	●	-
	IgM	●	-
	IgG/IgA	-	●
サル*	IgA	●	-
サル*	IgG/IgA	-	●
マウス	IgA	●	-
	IgG	●	-
	IgM	●	-

*アカゲザル、カニクイザルに対する交差性を確認済み

ELISpot キット

■ 種：ヒト

品名	メーカー	品番	包装	希望販売価格
ELISpot Flex: IgA, Human, Alkaline Phosphatase	MAB	3860-2A	1 KIT [for 4 plates]	￥93,000
ELISpot Flex: IgA, Human, Horseradish Peroxidase	MAB	3860-2H	1 KIT [for 4 plates]	￥93,000
ELISpot Flex: IgE, Human, Alkaline Phosphatase	MAB	3810-2A	1 KIT [for 4 plates]	￥93,000
ELISpot Flex: IgE, Human, Horseradish Peroxidase	MAB	3810-2H	1 KIT [for 4 plates]	￥93,000
ELISpot Flex: IgG, Human, Alkaline Phosphatase	MAB	3850-2A	1 KIT [for 4 plates]	￥93,000
ELISpot Flex: IgG, Human, Horseradish Peroxidase	MAB	3850-2H	1 KIT [for 4 plates]	￥93,000
ELISpot Flex: IgM, Human, Alkaline Phosphatase	MAB	3880-2A	1 KIT [for 4 plates]	￥93,000
ELISpot Flex: IgM, Human, Horseradish Peroxidase	MAB	3880-2H	1 KIT [for 4 plates]	￥93,000

■ 種：サル

品名	メーカー	品番	包装	希望販売価格
ELISpot Flex: IgA, Monkey, Alkaline Phosphatase	MAB	3860M-2A	1 KIT [for 4 plates]	￥93,000
ELISpot Flex: IgA, Monkey, Horseradish Peroxidase	MAB	3860M-2H	1 KIT [for 4 plates]	￥93,000

■ 種：マウス

品名	メーカー	品番	包装	希望販売価格
ELISpot Flex: IgA, Mouse, Alkaline Phosphatase	MAB	3865-2A	1 KIT [for 4 plates]	￥93,000
ELISpot Flex: IgA, Mouse, Horseradish Peroxidase	MAB	3865-2H	1 KIT [for 4 plates]	￥93,000
ELISpot Flex: IgG, Mouse, Alkaline Phosphatase	MAB	3825-2A	1 KIT [for 4 plates]	￥93,000
ELISpot Flex: IgG, Mouse, Horseradish Peroxidase	MAB	3825-2H	1 KIT [for 4 plates]	￥93,000
IgM ELISpot BASIC, Mouse, Alkaline Phosphatase	MAB	3845-2A	1 KIT [for 4 plates]	販売終了
IgM ELISpot BASIC, Mouse, Horseradish Peroxidase	MAB	3845-2H	1 KIT [for 4 plates]	販売終了

FluoroSpot キット

品名	メーカー	品番	包装	希望販売価格
IgG/IgA FluoroSpot kit, Human	MAB	FS-05R06G-2	1 KIT [2 plates]	販売終了
IgG/IgA FluoroSpot kit, Human	MAB	FS-05R06G-10	1 KIT [10 plates]	販売終了
IgG/IgA FluoroSpot kit, Monkey	MAB	FS-05R24G-2	1 KIT [2 plates]	販売終了
IgG/IgA FluoroSpot kit, Monkey	MAB	FS-05R24G-10	1 KIT [10 plates]	販売終了