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記事ID : 17795
研究用

Meprin α 活性を短時間で高感度に検出 SensoLyte® 520 メプリンα/β 活性測定キット(蛍光)

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メプリンα またはメプリンβ の活性を蛍光により検出するキットです。
精製酵素の調製や化合物スクリーニング時に有用です。

背景

メプリンα(Meprin α)

メプリンα はアスタシンファミリーおよびメトジンシンスーパーサブファミリーに含まれる、亜鉛エンドペプチダーゼです1。メプリンα は細胞外マトリックスタンパク質(pro-collagen I fibronectin, osteopontin , SPARC)、成長因子(VEGF-A, CTGF)、プロテイナーゼ(MMP-1)を分解します2-4。メプリンα は癌の増殖、転移、浸潤に関与することが報告されています2, 5-7

メプリンβ(Meprin β)

メプリンβ はタイプ I 膜貫通型メタロプロテアーゼで、亜鉛エンドペプチダーゼのアスタシンファミリーとメトシンジンスーパーファミリーに属しています1。メプリンβ は、腎臓、腸、表皮、白血球、癌細胞など複数の細胞種で発現が確認されています2。メプリンβ の生理的機能は完全には明らかにされていませんが、炎症の応答やコラーゲンの集合、癌の進行やβ アミロイドタンパク質の分解など、様々な役割を果たします1-5。また、近年の研究により、血管新生、癌、炎症、線維症、神経変性疾患の制御において治療標的として有望であることが示唆されています6-8

特長

     
  • メプリン(α、β)の活性測定に最適化されたキット
  • 96ウェルフォーマットで100アッセイ可能、優れたコストパフォーマンス
  • 1時間以内に測定完了

メプリンα 活性測定キット(品番:AS-72253)

本キットで用いるFRET基質はメプリンα の活性測定に最適化されており、メプリンβ、ADAM10、βセクレターゼ、BACE-2、ECEs、TACEとの交差反応性が抑制されています。活性化型のメプリンα がFRET基質を分解することで5-FAMの蛍光が増幅され、Ex/Em = 490 nm/520 nm でモニターできます。5-FAMの蛍光は長波長のため、生体試料や試験化合物の自家蛍光による影響を抑えることができます。本キットの検出限界は 0.1 ng Meprin α/mLです。

メプリンβ 活性測定キット(品番:AS-72254)

本キットで用いるFRET基質はAPP配列に由来しており、メプリンβ、ADAM10、β-アミロイド、BACE-2、IDE、ECEs、ネプリライシン、TACEとの交差反応性が抑制されています。活性化型のメプリンβ がFRET基質を分解することで5-FAMの蛍光が増幅され、Ex/Em = 490 nm/520 nm でモニターできます。5-FAMの蛍光は長波長のため、生体試料や試験化合物の自家蛍光による影響を抑えることができます。本キットの検出限界は 0.048 ng Meprin β/mLです。

構成内容

     
  • 5-FAM /QXL™ 520 Meprin α (または Meprin β) substrate
    (Ex/Em=490 nm/520 nm upon cleavage)
  • 5-FAM fluorescence reference standard
    (Ex/Em=490 nm/520 nm)
  • Human recombinant Meprin α (または Meprin β)
  • Meprin α (または Meprin β) activation buffer
  • Meprin α (または Meprin β) stop solution
  • 2X Assay Buffer
  • Inhibitor

製品データ

メプリンα 活性測定キット(品番:AS-72253)

Actinonin によるメプリンα 活性の阻害

図1 Actinonin によるメプリンα 活性の阻害

メプリンβ 活性測定キット(品番:AS-72254)

Actinonin によるメプリンβ 活性の阻害

図2 Actinonin によるメプリンβ 活性の阻害

参考文献

メプリンα 活性測定キット(品番:AS-72253)

  1. Becker-Pauly, C. et al, J Invest Dermatol 127, 1115 (2007)
  2. Breig, O. et al, Oncotarget 18632, 13975 (2016)
  3. Broder, C. et al, Biochem J 450, 253 (2013)
  4. Jefferson, T. et al, Cell Mol Life Sci 70, 309 (2013)
  5. Minder, P. J Biol Chem 287, 35201 (2012)
  6. Lottaz, D. et al, PLoS One 6, e26450 (2011)
  7. Ito, S. et al, Biochem Biophys Res Commun 451, 548 (2014)

メプリンβ 活性測定キット(品番:AS-72254)

  1. Broder, C. et al, Biochem J 450, 253 (2013)
  2. Marín, I. et al, PLoS One 10, 8 (2015)
  3. Prox, J. et al, Matrix Biol 44-46, 7 (2015)
  4. Schönherr, C. et al, Mol Neurodegener 11, 19 (2016)
  5. Jäckle, F. et al, Biochem J 470, 91 (2015)
  6. Chaudhuri, A. et al, Comb Chem High Throughput Screen 19, 246 (2016)
  7. Madoux, F. et al, Biopolymers 102, 396 (2014)
  8. Schlenzig, D. et al, Protein Expr Purif 116, 75 (2015)

SensoLyte® 520 メプリンα 活性測定キット(蛍光)

品名 メーカー 品番 包装 希望販売価格
SensoLyte(R) 520 Meprin α Activity Assay Kit *Fluorimetric*詳細データ ASI AS-72253 1 KIT
¥165,000

SensoLyte® 520 メプリンβ 活性測定キット(蛍光)

品名 メーカー 品番 包装 希望販売価格
SensoLyte(R) 520 Meprin β Activity Assay Kit *Fluorimetric*詳細データ ASI AS-72254 1 KIT
¥165,000

商品は「研究用試薬」です。人や動物の医療用・臨床診断用・食品用としては使用しないように、十分ご注意ください。

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