記事ID ： 16145

メチル化RNA／ssDNA（一本鎖DNA）の同定および精製に N⁶-メチルアデノシンモノクローナル抗体

メーカー名：Enzo Life Sciences,Inc.

N⁶-メチルアデノシンモノクローナル抗体（クローン 17-3-4-1）は、メチル化RNA／ssDNA（一本鎖DNA）の同定や精製にご使用いただけます。

背景

N⁶-メチルアデノシン（m6A）

N⁶-メチルアデノシン（m6A）は、全ての種で、mRNA、tRNA、snRNA、ノンコーディングRNA に多く見られる修飾です。RNAアデノシンのメチル化は、哺乳動物では METTL3/MT-A70、METTL14、WTAP からなる多成分複合体によって触媒されます。METTL3 および METTL14 は、複合体のメチルトランスフェラーゼ活性に関与し、WTAP は基質のリクルートを仲介します。

仕様

クローン	17-3-4-1
免疫動物	マウス
アイソタイプ	IgG1λ
抗原	Hapten N6-methyladenosine-5’-mono-phosphate conjugated to BSA of all N6-methyladenosine (m6A).
種特異性	種特異性なし
特異性	アデノシンN6位のメチル化を受けたRNA／一本鎖DNAを認識
アプリケーション	IP、ドットブロット
推奨希釈倍率	ドットブロット（1:1,000）推奨希釈倍率はアプリケーションによって異なる
精製	Protein G によるアフィニティー精製

使用例

ウェスタンブロット解析

図1 ウェスタンブロット解析
(A) N6-メチルアデノシンモノクローナル抗体（17-3-4-1）
(B) 市販のウサギポリクローナル抗体

N6-メチルアデノシンモノクローナル抗体（17-3-4-1）を用いて、合成したメチル化／非メチル化RNA をノースウェスタンブロット法により検出した。

図2 N⁶-メチルアデノシンモノクローナル抗体（17-3-4-1）を用いて、合成したメチル化／非メチル化RNA をノースウェスタンブロット法により検出した。

N6-メチルアデノシンモノクローナル抗体（17-3-4-1）を用いて、合成したメチル化転写産物を精製した。

図3 N⁶-メチルアデノシンモノクローナル抗体（17-3-4-1）を用いて、合成したメチル化転写産物を精製した。IPにより、放射線標識した非メチル化（コントロール、350 nt）／メチル化（250 nt）転写産物を分離することができる。

参考文献

An Adenine Code for DNA: A Second Life for N6-Methyladenine: H. Heyn, et al.; Cell 161, 710 (2015), (Review), Abstract;
DNA Methylation on N6-Adenine in C. elegans: E.L. Greer, et al.; Cell 161, 868 (2015), Abstract;
N6-Methyladenine DNA Modification in Drosophila: G. Zhang, et al.; Cell 161, 893 (2015), Abstract;
N6-Methyldeoxyadenosine Marks Active Transcription Start Sites in Chlamydomonas: Y Fu, et al.; Cell 161, 879 (2015), Abstract;