本キットを用いることで、(1)喀痰サンプルの簡単かつ安全な採取、(2)外気温でのサンプル中喀痰DNA の保存と輸送、(3)各研究室環境におけるハイクオリティーなDNAの単離、が可能になりました。
特長
- 迅速な細胞の溶解が可能
- 細菌や真菌、ウイルスの増殖を防ぐため、安全な取り扱いが可能
- サンプルは2年以上DNA分解されずに保存可能
構成内容
- 喀痰DNA採取、保存容器
- 採取用チューブ
- 採取用ろうと
- 保存用アンプル
- ラベル
- ドナーインストラクション
- 喀痰液化バッファー
- タンパク質分解酵素K
- 精製用添加剤
使用方法
図1 プロトコール
使用例
図2 単離した喀痰DNA
本キットの採取容器を用いて16人のドナーから喀痰サンプルを採取し、喀痰DNA単離キットによりDNAを単離した。ドナーの健康状態に応じて喀痰DNAの収量は大きく異なるが、本キットを使用した場合、文献で述べられている収量と同等もしくはそれ以上のDNAを単離可能。
図3 喀痰DNAのリアルタイムPCR増幅
本キットを用いてドナーより喀痰サンプルを採取し、室温または55℃で保存。各サンプルから0、1、2、4 週間後にDNAを単離し、これをテンプレートにリアルタイムPCR反応を行った(5sに特異的なプライマーを使用)。その結果、全てのサンプルが増幅されていることから、保存されたサンプルから精製されたDNA が高精度であることがわかる。喀痰DNAは長期保存が可能であり、かつ、リアルタイムPCR等、その後の解析にも適している。
図4 喀痰液化バッファーを用いた、サンプル中からのゲノムDNA分離
喀痰サンプル(0.2f)に同量の喀痰液化バッファーを加えて希釈した(終濃度=50b/fジチオスレイトール)。サンプルを時々撹拌させながらインキュベーションした(37℃)。ノルジェンバイオテック社の喀痰DNA 分離キット(品番:46200)を用いて、喀痰サンプルからゲノムDNAを分離した。溶出したDNAをアガロースゲル(1×TAE、1%アガロースゲル)にアプライした(150V、30分間)後、エチジウムブロマイドで染色した。
喀痰(かくたん)DNA採取・保存・抽出キット
品名 | メーカー | 品番 | 包装 | 希望販売価格 |
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Sputum Collection, Preservation and Isolation Kit | NOG | RU46100 | 50 PREP. [50 Devices] |
販売終了 |
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商品は「研究用試薬」です。人や動物の医療用・臨床診断用・食品用としては使用しないように、十分ご注意ください。
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