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Nutragen®コラーゲンは、高純度のウシ由来I型コラーゲン（濃度：6 mg/ml，50ml）です。細胞培養容器のコーティングや3Dゲル調製にご使用いただけます。
- 高純度（>99.9%）
- 機能的
- 高い再現性
- 卓越したロット一貫性
細胞培養用コラーゲンI
特長
Nutragen® コラーゲン
Nutragen®は、高純度（>99.9%）な標準的コラーゲンで、機能的に天然型コラーゲンに近い性質を有しています。本製品は、ウシ皮膚から分離された後、厳格な品質基準に準拠して製造されているため、卓越したロット間の一貫性をもたらします。また、約97％のI型コラーゲン（残りはIII型コラーゲン）から構成され、ゲル浸透クロマトグラフィーによって高いモノマー含量を有することが調べられています。約6 mg/mlの濃度で供給されます（各ロットの濃度は、購入ロットの 試験成績書；CoA 
を参照ください）。
Nutragen®は、可溶性アテロコラーゲンです（in 0.01N HCI，pH 約2.0）。 Nutragen®コラーゲンは、細胞培養容器の表面コーティングや3Dゲルとしての使用に最適な、フィルター滅菌済みの ready to use 溶液です。
コラーゲン仕様（試験項目、試験方法）
| Parameter, Testing, and Method | Nutragen® Collagen Solution （品番：5010-50ML） |
|---|---|
| 滅菌方法 | Filtration |
| 形状 | Solution |
| 包装サイズ | 50 mL |
| 保存温度 | 2-10 ℃ |
| 有効期限 | Listed on product label and Certificate of Analysis |
| 濃度 （ビウレットタンパク質定量法） |
5.8-6.8 mg/mL |
| 純度 （コラーゲン濃度） |
>99.9% |
| pH | Approx. pH 2, 0.01 N HCl |
| ゲル化時間（Gel Time Assay） | ≤40 minutes |
| 原線維形成 （Fibril Formation） |
>0.5 Absorbance Units |
| ポリアクリルアミド電気泳動（SDS-PAGE） | ≥85% collagen containing within alpha, beta,and gamma bands ≤15% collagen contained with bands traveling faster than alpha |
| 無菌性 | No growth |
| エンドトキシン (LAL) |
≤1.0 EU/ml |
| 細胞接着アッセイ | Pass |
| 由来 | Bovine Hide - Pepsin Extracte |
Nutragen® 使用時の細胞接着アッセイデータ
細胞接着アッセイ
細胞接着性の検証のため、Nutragen®コート容器と非コート容器（コントロール）にそれぞれ細胞を播種した（無血清DMEM培地を使用）。1％BSAを含む溶液でブロッキング後、細胞を37℃で1時間接着させた。
DPBSで洗浄後、Nutragen®を使用した場合に有意な細胞接着性を示した。
| Nutragen® 無し （コントロール） | Nutragen® 有り |
|---|---|
 |
 |
| Human Umbilical Vein Endothelial Cells (HUVEC) 10X | |
 |
 |
| VERO Epithelial Cells 10X | |
 |
 |
| Human Dermal Fibroblast Cells 10X | |
 |
 |
| MDCK Epithelial Cells 10X | |
プロトコール ‐概要‐
培養容器コーティング手順
- 必要量のコラーゲンをボトルから取り出し、希釈容器に分注します。
- Nutragen®を水で、〜50-100 µg/ml （〜1:30）に希釈します。（0.01 N HCl溶液も使用可能）。
- コラーゲン溶液が完全に混合するまで、回転させながら穏やかに混ぜます。
- 培養容器に、表面全体が完全にコーティングされる最適量の希釈Nutragen®を添加します。
- 室温または37℃で1-2時間インキュベートします。
- インキュベート後、上清を吸引除去します。
- 滅菌培地またはPBSでコート表面を傷つけないように慎重にリンスします。
- 細胞培養を開始します。無菌性が保たれる場合、湿潤条件下または乾燥空気条件で2〜8℃で保存できます。
3D ゲル調製手順
- 10X PBS または 10X 培養液と冷却されたコラーゲン溶液を 1:8の割合で回転させながら穏やかに混合します。
- 滅菌された 0.1 M NaOHで、pH 7.2–7.6に調製します。
- 滅菌水を加え、トータル量を10に合せます。
- ゲル化を防ぐために、混合液を2〜10 ℃の温度で維持します。
- 37 ℃でゲルを形成させます。（約90分〜120分でゲルが形成されます。）
ゲル作製手順動画
| 品名 | メーカー | 品番 | 包装 | 希望販売価格 |
|---|---|---|---|---|
Nutragen(R) Atelocollagen Solution, Bovine |
ADM | 5010-50ML | 50 ML [6 mg/mL] |
￥145,000 |
商品は「研究用試薬」です。人や動物の医療用・臨床診断用・食品用としては使用しないように、十分ご注意ください。
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