記事ID ： 7981

乳酸菌細胞壁溶解酵素 Labiase

Labiase酵素は、乳酸菌、火落菌をはじめとする細菌類の溶菌に適した細胞壁溶解酵素です。

特長

Labiaseは、Streptomyces fulvissimus TU-6株の培養液上清より調製され、β-N-アセチル-D-グルコサミニダーゼ、ムラミダーゼを主体とする複合酵素剤で、以下のような特徴が有ります。

500 ｍｇ／バイアル
β-N-アセチル-D-グルコサミニダーゼ活性 10 U／g 以上

凍結乾燥粉末（賦形剤として乳糖を含む）

4℃乾燥状態

Levilactobacillus brevis IFO3345 を基質とした溶菌活性^＊1 にて温度および pH の影響を評価した。


図1．温度一括性、安定性曲線	図2．ｐH一括性、安定性曲線

図1
安定性：
pH^＊2を6.4に調整し各温度にて1時間保存したLabiaseを用いて、37℃で1時間溶菌反応を行った際の溶菌率にて評価した。
活性：
pH^＊2を6.4に調整し各温度で10分間溶菌反応を行った際の溶菌率にて評価した。

図2
安定性：
各pH^＊2に調整し25℃で20時間保存したLabiaseを用いて、37℃で30分間溶菌反応を行った際の溶菌率にて評価した。
活性：
各pH^＊2にて37℃で30分間溶菌反応を行った際の溶菌率にて評価した。

^＊1溶菌活性の定義
基質懸濁液の濁度（OD660）の減少を溶菌率として測定した。
^＊2 使用緩衝液：
McIlvaine緩衝液　pH 3～8
ほう酸ー水酸化ナトリウム緩衝液　pH 8～9

^＊3 β-N-アセチル-D-グルコサミニダーゼ活性の定義
ｐ-ニトロフェニル-β-N-アセチル-D-グルコサミンを基質として酵素を作用させたとき、１分間に１μmolのp-ニトロフェノールを遊離する酵素活性を１Ｕとする。

^＊4 ムラミダーゼ活性の定義
Micrococcus lysodeikticus（ATCC No. 4698）菌体を基質として酵素を作用させたとき、１分間に濁度（ＯＤ540）を0.001減少させる酵素活性を１Ｕとする。

^＊5 エンドペプチダーゼ活性の定義
カゼインを基質として酵素を作用させたとき、１分間に１μmol のチロシン相当量を生ずる酵素活性を１Ｕとする。

^＊6 但し各酵素活性は、ロットによって幅があります。また、ムラミダーゼ、エンドペプチダーゼの値は代表サンプル値であり、規格値ではありません。

菌株の種類や菌の培養条件及び生育状態にもよりますが、通常は反応液量に対して0.5～1.0％くらい用いていただければ結構です。また使用量は用途等に応じて適宜調製して下さい。

LabiaseはDNase活性を若干有するため、DNAの抽出には5mM EDTAを含むバッファーを用いて下さい。

参考文献

長谷川和哉、大淵和彦、浜地正昭、熊谷知栄子：公開特許公報，平11-056348.
長谷川和哉、大淵和彦、尾関健二、浜地正昭、熊谷知栄子：公開特許公報，2002-261.
Ohbuchi, K., Hasegawa, K., Hamachi, M., Ozeki, K., and Kumagai, C.(2001) J. Biosci. Bioeng. 91, 487.