Rockland社と MD Anderson Cancer Center が共同で開発した、特異性の高いPARP1［ポリ（ADPリボース）ポリメラーゼ-1］ポリクローナル抗体です。siRNA によるノックダウンを行った細胞ライセート（およびコントロール）を用いて、複数のイムノアッセイで検証済みです。
本抗体は特異性が高く、最適化された方法で使用することにより、他の17種類のPARPファミリーから、PARP1を特異的かつ定量的に識別することが可能です。
PARP1は、クロマチンに結合するADPリボシル化酵素で、心臓リモデリング、血管収縮、アストロサイトおよびミクログリアの機能調節、長期記憶、老化、転写制御、DNA修復などの様々な細胞機能に重要な役割を果たしています。
PARP1［Poly (ADP-ribose) polymerase-1］は、ポリ（ADPリボース）ポリメラーゼファミリーの主要なメンバーで、ポリADPリボシル化によりDNA損傷シグナルを活性化する（および、修復タンパク質をリクルートする）機能を有します。また、PARP1は、アポトーシス、ネクローシス、オートファジー、パータナトス（parthanatos）など、複数の細胞死経路に関与します。パータナトスは、比較的最近報告された新しい形態の細胞死です。
また、PARP1は、細胞死プログラムのバランス（オートファジーとネクローシス）をシフトさせることにより、組織の生存を促進します。DNA修復機構の異常による癌は、PARP阻害剤に対して脆弱性を示すことが臨床研究で示されています。
本抗体は、DNA損傷、転写制御、幹細胞の識別などの細胞プロセス研究に有用です。
［構成内容］
［構成内容］
| 免疫動物 | ウサギ |
|---|---|
| タイプ | ポリクローナル |
| 適用 | ウェスタンブロット 1:1000 |
| 性状 | 液体（フィルター滅菌済み） |
| アイソタイプ | IgG |
| 標識 | なし |
| 濃度 | 1.0 mg/mL （280 nm の吸光度から算出） |
| バッファー | 0.02 M リン酸カリウム、0.15 M 塩化ナトリウム, pH 7.2 0.01% (w/v) アジ化ナトリウム |
| 精製 | 単特異性抗血清を Protein A を固定化したアガロースビーズを用いて 免疫アフィニティークロマトグラフィーで精製 |
| 特異性 | ヒトPARP1タンパク質に特異的 |
| 抗原 | ヒトPARP1 zinc finger ドメイン（N末端）リコンビナントタンパク質 |
図1 本抗体を用いた Peggy Sue™ キャピラリー電気泳動
UV固定化時間： 250秒
一次抗体濃度： 20µg/mL
一次抗体インキュベーション時間： 180 分
露光時間： マルチ画像解析
画像のご提供： Phil Lorenzi (MD Anderson Cancer Center)
図2 本抗体を用いた内在性 PARP1 のウェスタンブロット
レーン1： OVCAR8 野生型ライセート
レーン2： OVCAR8 PARP1 KO ライセート
ローディング量： 5μg／レーン
一次抗体： 1µg/mL の本抗体を用いて 4℃・オーバーナイトでインキュベート
二次抗体： 1:40,000 で希釈した HRP Gt-a-Rb IgG を用いて室温で30分間インキュベート
ブロッキング： MB-070 を用いて 4℃・オーバーナイト
予測／観察されるサイズ： 113 kDa（内在性PARP1）
その他のバンド： なし
画像は Phil Lorenzi (MD Anderson Cancer Center) とのコラボレーションによる
図3 本抗体を用いたリコンビナントPARP1のウェスタンブロット
レーン1： PARP1-Zinc Finger ドメイン リコンビナントタンパク質
ローディング量： 0.05 µg／レーン
一次抗体： 1µg/mL の本抗体を用いて 4℃・オーバーナイトでインキュベート
二次抗体： 1:40,000 で希釈した HRP Gt-a-Rb IgG を用いて室温で30分間インキュベート
ブロッキング： MB-070 を用いて 4℃・オーバーナイト
予測／観察されるサイズ： 13 kDa［rPARP1（N末端 ZF1）］
その他のバンド： なし
| 品名 | メーカー | 品番 | 包装 | 希望販売価格 |
|---|---|---|---|---|
Anti PARP1 (N-term ZF1), Human (Rabbit) Unlabeled |
RKL | 200-401-GM8S | 25 UL |
￥30,000 |
| Anti PARP1 (N-term ZF1), Human (Rabbit) Unlabeled |
RKL | 200-401-GM8 | 100 UG |
￥115,000 |
| 免疫動物 | ウサギ |
|---|---|
| タイプ | ポリクローナル |
| 適用 | ウェスタンブロット 1:1000 |
| 性状 | 液体（フィルター滅菌済み） |
| アイソタイプ | IgG |
| 標識 | なし |
| 濃度 | 1.0 mg/mL （280 nm の吸光度から算出） |
| バッファー | 0.02 M リン酸カリウム、0.15 M 塩化ナトリウム, pH 7.2 0.01% (w/v) アジ化ナトリウム |
| 精製 | 単特異性抗血清を Protein A を固定化したアガロースビーズを用いて 免疫アフィニティークロマトグラフィーで精製 |
| 特異性 | ヒトPARP1タンパク質に特異的 |
| 抗原 | ヒトPARP1触媒ドメイン（C末端）リコンビナントタンパク質 |
図1 本抗体を用いた Peggy Sue™ キャピラリー電気泳動
UV固定化時間： 250秒
一次抗体濃度： 20µg/mL
一次抗体インキュベーション時間： 180 分
露光時間： 10秒
画像のご提供： Phil Lorenzi (MD Anderson Cancer Center)
図2 本抗体を用いたウェスタンブロット
レーン1： 野生型コントロール
レーン2： ノックアウト
ローディング量： 5μg／レーン
一次抗体： 1:1000 で希釈した本抗体を用いて 4℃・オーバーナイトでインキュベート
二次抗体： 1:40,000 で希釈した HRP Gt-a-Rb IgG を用いて室温で30分間インキュベート
ブロッキング： MB-070 を用いて 4℃・オーバーナイト
予測／観察されるサイズ： 113 kDa（内在性PARP1）
その他のバンド： なし
画像は Phil Lorenzi (MD Anderson Cancer Center) とのコラボレーションによる
図3 本抗体を用いたリコンビナントPARP1のウェスタンブロット
レーン1： PARP1 触媒ドメイン リコンビナントタンパク質
ローディング量： 0.05 µg／レーン
一次抗体： 1µg/mL の本抗体を用いて 4℃・オーバーナイトでインキュベート
二次抗体： 1:40,000 で希釈した HRP Gt-a-Rb IgG を用いて室温で30分間インキュベート
ブロッキング： MB-070 を用いて 4℃・オーバーナイト
予測／観察されるサイズ： 〜19 kDa［rPARP1（内在性）］
その他のバンド： なし
| 品名 | メーカー | 品番 | 包装 | 希望販売価格 |
|---|---|---|---|---|
| Anti PARP1 (internal), Human (Rabbit) Unlabeled |
RKL | 200-401-X51S | 25 UL |
￥30,000 |
| Anti PARP1 (internal), Human (Rabbit) Unlabeled |
RKL | 200-401-X51 | 100 UG |
￥115,000 |
PARP1（N末端 ZF1）抗体（品番： 200-401-GM8）を用いた免疫アッセイのコントロールとして適しています。
| E. coli で発現させた N末端 His タグ リコンビナントタンパク質 （ヒトPARP1 zinc finger ドメインに相当） |
|
| 性状 | 液体（フィルター滅菌済み） |
| 標識 | なし |
| 濃度 | 1.0 mg/mL ［ローリー法（変法）で測定］ |
| バッファー | 0.02 M リン酸カリウム、0.15 M 塩化ナトリウム, pH 7.2 0.01% (w/v) アジ化ナトリウム、10% (v/v) グリセロール |
| 品名 | メーカー | 品番 | 包装 | 希望販売価格 |
|---|---|---|---|---|
| PARP1 (N-term ZF1) Control Protein, Human |
RKL | 009-001-GM8 | 25 UG |
￥26,000 |
PARP1（内在性）抗体（品番： 200-401-X51）を用いた免疫アッセイのコントロールとして適しています。
| E. coli で発現させた N末端 His タグ リコンビナントタンパク質 ［ヒトPARP1 触媒ドメイン、Breast Cancer Suppressor Protein（BRCA1）、カルボキシ末端ドメインを含む］ |
|
| 性状 | 液体（フィルター滅菌済み） |
| 標識 | なし |
| 濃度 | 1.0 mg/mL ［ローリー法（変法）で測定］ |
| バッファー | 0.02 M リン酸カリウム、0.15 M 塩化ナトリウム, pH 7.2 0.01% (w/v) アジ化ナトリウム、10% (v/v) グリセロール |
| 品名 | メーカー | 品番 | 包装 | 希望販売価格 |
|---|---|---|---|---|
| PARP1 (internal) Control Protein, Human |
RKL | 009-001-X51 | 25 UG |
販売終了 |
| 品名 | メーカー | 品番 | 包装 | 希望販売価格 |
|---|---|---|---|---|
| PARP1 (N-term ZF1) Antibody Set, Human (Rabbit) |
RKL | KCC-GM8 | 1 SET |
￥65,000 |
| 品名 | メーカー | 品番 | 包装 | 希望販売価格 |
|---|---|---|---|---|
| PARP1 (internal) Antibody Combo Pack, Human (Rabbit) |
RKL | K-X51 | 1 PACK |
￥41,000 |
商品は「研究用試薬」です。人や動物の医療用・臨床診断用・食品用としては使用しないように、十分ご注意ください。
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