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研究用

抗体ファージディスプレイライブラリーのスクリーニング後に! 一本鎖抗体発現用プラスミドベクター pOPE101

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大腸菌内での一本鎖抗体発現用に最適化されたプラスミドベクターです。ハイブリドーマやB細胞、ファージディスプレイライブラリーから、抗体の重鎖と軽鎖の可変領域の遺伝子をクローニングできます。

背景

大腸菌内では完全な免疫グロブリン分子の産生は非常に困難です。近年、リコンビナント一本鎖抗体を発現させるため、リコンビナント抗体作製技術が開発されています。これまで一本鎖抗体は、in vitroでリフォールディングが必要な細胞質封入体として抽出されていましたが、そのフォールディング効率は非常に低いため、真核細胞内の抗体のフォールディング条件を真似た別の戦略が開発されました。抗体断片をペリプラズムに分泌させる事で、正確な分子内ジスルフィド結合を有する可溶性、かつその機能を保持したタンパク質として産生する事が可能になりました。その収量はリフォールディングが必要な細胞質封入体の収量よりも少なくなりますが、抗体の活性や特異性の評価のために用いられています。

PROGEN社では、大腸菌内で機能的な一本鎖抗体を発現するためのプラスミドベクターpOPE101を提供しています。

特長

  • ペリプラズムに分泌するためのpelB配列と、検出と精製のための6x Hisタグ配列を有する
  • 重鎖(VH)クローニング用としてNcoIサイトとHindIIIサイト、軽鎖(VL)クローニング用としてMluIサイトとNotIサイトを有する
  • 重鎖(VH)と軽鎖(VL)は抗体の定常領域CH1の最初の6アミノ酸とブタαチューブリンの配列(EEGEFSEAR)を含む18アミノ酸で連結
  • IPTG誘導性のプロモーター、T7ターミネーター、複製起点ColE1、アンピシリン耐性遺伝子を有する

pOPE 101 Expression Vector
図.1 pOPE 101 Expression Vector

一本鎖抗体発現用プラスミドベクター pOPE101

品名 メーカー 品番 包装 希望販売価格
Expression Vector pOPE101詳細データ PGN PR3004 5 UG
¥85,000

【関連商品】Phagemid Vector pSEX81(ファージミドベクター)

pSEX81はM13ファージ(繊維状ファージ)の表面に機能的な一本鎖抗体(single-chain Fraction of variable region antibody、scFv)-pIII融合タンパク質を発現するためのファージミドベクターで、ファージ抗体ライブラリの作製にご利用いただけます。

品名 メーカー 品番 包装 希望販売価格
pSEX81 Surface Expression Phagemid Vector詳細データ PGN PR3005 5 UG
¥85,000

商品は「研究用試薬」です。人や動物の医療用・臨床診断用・食品用としては使用しないように、十分ご注意ください。

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