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初期ADMETスクリーニングに最適なUDPアッセイキット Transcreener® UDP2 Assay
BellBrook社；初期ADMETスクリーニングに最適なUDPアッセイキット

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メーカー名：BellBrook Labs,LLC

背景

ヒトゲノム上には200種類を超える糖転移酵素がコードされており、そのほとんどは UDP 結合型の糖をドナーとして使用します。この糖転移酵素は次の３つのタイプに大別できます。　1. デンプンやヒアルロン酸などの二糖類や多糖類の生合成、2. タンパク質の翻訳後修飾、3. 内因性のホルモンや生体異物を含む小分子のグルクロン酸抱合。これら3つのタイプの糖転移酵素はどれも創薬分野で関心が寄せられてきました。
近年、薬物代謝において約15種類の肝臓の UDP-glucuronosyltransferases (UGTs) の役割が注目され、生体高分子の合成におけるタンパク質糖転移酵素や関連酵素が、癌やリソソーム蓄積症の治療ターゲットとされています。細胞壁合成に関与する細菌の糖転移酵素もまた、新規の抗感染薬開発のターゲットとされています。
UGTs はUDP-グルクロン酸 (UDPGlcA) を糖供与体として基質分子にグルクロン酸(GlcA) を転移し、GlcA との複合体(glucuronoside) を形成するグルクロン酸抱合反応を触媒します。糖の付加により基質分子の水溶性が高まり、胆汁や血液への移行を調整することで、より排出されやすい可溶性物質の形成を触媒します。

ベルブルック社の Transcreener® UDP² Assay Platform はUGTs の HTS に最適で、グルクロン酸抱合反応により産出された UDP を、競合的蛍光偏光法を用いて検出します。

特長

●ヒト肝ミクロソーム（HLM）を用いた代謝安定性の研究に最適です。
●蛍光物質としてFar Red （赤色）を使用することで、HLM で起こるバックグラウンド蛍光の干渉を抑えることができます。
●化合物干渉は起こしません。
●優れた蛍光偏光度（mP shifts）を示します。
●Robust: 初期速度において、>0.7のZ'値

使用可能な機器については、こちらをご参照ください。

使用可能な酵素例

UDP-Glycosyltransferases
●glucosyltransferase
●galactosyltransferase
●glucuronyltransferase
●N-acetylglucosamyltransferase
●N-acetylgalactosyltransferase
●xylosyltransferases

Synthase
●glycogen synthases
●cellulose synthases
●hyaluronan synthases

UDP2_0.1.gif
Fig.1 Transcreener® UDP² Assay の原理
UDP-sugar (GA) から糖転移により産出されたUDP を、競合蛍光偏光イムノアッセイ法を用いて測定します。この方法は不変の反応生成物の検出による測定のため、同じ検出試薬でどのようなUGTsにも利用可能です。
トレーサーの蛍光物質には、AlexaFluor® 633を使用

Fig2. UDP² Antibody Titrations at Various UDP-Glucuronic acid Concentrations.

Fig3. Typical UDP Enzyme Titration.
Based on this curve, the optimal enzyme amount would be 20-40 units.

Fig4. UDP-glucuronic acid/UDP Standard Curves.

構成内容

● UDP² AlexaFluor® 633 Tracer, 800 nM
● UDP² Antibody
● Stop & Detct Bufrer B, 5X
● 5mM UDP

●上記キットはトライアルサイズ(1,000アッセイポイント分)です。
●バルクサイズでご購入いただく際は、必要アッセイポイント数をご連絡ください。

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