記事ID ： 34049

ヒト血漿カリクレインの検出に SensoLyte® Rh110 Plasma Kallikrein Activity Assay kit Fluorimetric

メーカー名：Anaspec, Inc.

血漿カリクレイン活性を蛍光により検出するキットです。検出にはローダミン110フルオロフォア（Rh110）基質を用います。精製された酵素調製物、生物学的サンプル中の酵素活性を検出するために使用することができ、化合物スクリーニングにも適用することができます。

背景

血漿カリクレインとは

セリンプロテアーゼであるヒト血漿カリクレインは、まず肝臓の不活性血漿プレカリクレインとして合成され、血漿中を循環します。活性化凝固因子XII（FXIIa）によって活性化されると、血漿カリクレインは高分子キニノーゲン（HMWK）からブラジキニン（炎症性メディエーター）を放出します。血漿カリクレインは、血液凝固、古典的補体カスケード経路および代替補体経路の活性化などのいくつかの生理学的および病理学的プロセスに関与します。1,2-5血漿カリクレインはまた、好中球からのエラスターゼ放出の誘発および線維素溶解におけるプロウロキナーゼのウロキナーゼへの変換において役割を果たします。

測定原理

血漿カリクレインはRh110基質を切断し、明るい緑色の蛍光の放出をもたらし、励起/発光=496 nm/520 nmで検出することができます。Rh110の長い波長スペクトルおよび高い吸光係数は、他の反応成分からの大きな感度および少ない干渉を提供します。このアッセイでは、1 ng/mLの血漿カリクレイン活性を検出することができます。

特長

ヒト血漿カリクレインの検出
アッセイ時間：1時間
高感度：1 ng/mL
詳細なプロトコルとリファレンスを提供

構成内容

血漿カリクレイン基質（切断時：Ex/Em=490/520nm）
ヒト血漿カリクレイン
血漿カリクレイン阻害剤
Rh110蛍光リファレンススタンダード
血漿プレカリクレイン活性化因子
アッセイバッファー

製品データ

図1. 血漿試料中に存在するカリクレイン活性
血漿サンプルを1×アッセイバッファーで希釈し、1時間のインキュベーション後に蛍光シグナルを測定した。

図2. プレカリクレインが枯渇したヒト血漿で試験したKitの特異性
血漿中のプレカリクレインの欠如は、プレカリクレインのカリクレインへの変換をもたらさなかった。

図3. PKSI-527によるカリクレイン活性の阻害
Ex/Em=490/520 nm（SpectraMax M5e）で蛍光シグナルが検出された。

SensoLyte® Rh110 Plasma Kallikrein 活性測定キット‐蛍光検出‐

品名	メーカー	品番	包装	希望販売価格
SensoLyte^(R) Rh110 Plasma Kallikrein Activity Assay kit Fluorimetric	ASI	AS-72255	1 KIT	￥158,000

［関連商品］SensoLyte® 活性測定キット‐蛍光検出‐

Aggrecanase - 1 活性，Thrombin 活性，Factor Xa 活性　アッセイキット

品名	メーカー	品番	包装	希望販売価格
SensoLyte^(R) 520 Aggrecanase-1 Assay Kit Fluorimetric	ASI	AS-72114	1 KIT [100 assays]	￥144,000
SensoLyte^(R) 520 Thrombin Activity Assay Kit Fluorimetric	ASI	AS-72129	1 KIT [100 Assays (96-well plate)]	￥165,000
SensoLyte^(R) AFC Thrombin Activity Assay Kit Fluorimetric	ASI	AS-72130	1 KIT [100 Assays (96-well plate)]	￥144,000
SensoLyte^(R) 520 Factor Xa Assay Kit Fluorimetric	ASI	AS-72208	1 KIT [100 assay]	￥158,000
SensoLyte^(R) Rh110 Factor Xa Assay Kit Fluorimetric	ASI	AS-72207	1 KIT [100 assay]	￥151,000