シリウスレッド染色による可溶性コラーゲン定量キット 可溶性コラーゲン定量アッセイキット（Soluble collagen assay）

可溶性コラーゲン定量アッセイキットは、可溶性コラーゲンまたは可溶化したコラーゲンの定量キットです。コラーゲン三本鎖らせんに結合する色素（シリウスレッド／Sirius Red）を用いて測定を行います。

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• コラーゲンの測定・定量方法

• 非種特異的に、全タイプの線維性コラーゲン（fibrillar collagen）を定量
• 測定サンプル：培養上清，細胞抽出物，可溶化コラーゲン画分
• 培地中の血清（〜10%）による影響なし
• 定量測定（測定波長：540nm）
• 測定範囲：0.5〜10 μg/ml，感度：0.69 μg/ml
• ELISA相当の簡便性
• 3時間以内の迅速プロトコル
• 4℃保存

＜その他仕様＞

• サンプル量：10-140 µl
• フォーマット：96ウェルマイクロタイタープレート

• プレートセット，バランスプレートセット:
  - 1 Assay microplate - 96 well polypropylene V-shaped microplate. Depending on the number of samples the plate can be cut for partial use.
  - 1 Reading microplate - 96 well clear polystyrene flat bottom microplate. This plate is used for the measurement of absorbance at 540 nm in a microplate reader; it can also be used as a holder for the assay plate during centrifugation.
  - 1 adhesive plate seals
• コラーゲンスタンダード溶液
  - Rat tail type 1 collagen, 714 µg/ml in 20 mM acetic acid. The solution can be used for multiple standard lines.
• Sarstedt チューブ 1.5 ml (containing 500 µl)
• 色素溶液
  - Sterile solution containing Sirius Red dye. Plastic bottle 15 ml (containing 8 ml)
• 希釈バッファー
  - Sterile buffer for blanks and standard / sample dilution. Plastic bottle 30 ml (containing 20 ml)
• 洗浄バッファー
  - Buffer containing detergent (inflammable). 120 ml bottle (containing 80 ml)
• 検出溶液
  - Sterile alkaline buffer. 30 ml bottle (containing 18 ml)

可溶性コラーゲン定量アッセイキットは、シリウスレッド（Sirius Red）染色に基づき測定します。シリウスレッド（Sirius Red）のコラーゲンへの結合後、コラーゲン‐色素複合体の沈殿が形成され、染色されたペレットを生じます。

■ アッセイ原理

※本製品を使用頂くにはマイクロプレート用遠心機が必要です。

可溶性コラーゲン定量アッセイキットでは、多様な種類の線維性コラーゲン（fibrillar collagen）を測定可能です。最も豊富に存在するコラーゲンの種類は、コラーゲンI（皮膚，骨，血管，結合組織）、コラーゲンII（軟骨）、コラーゲンIII（皮膚，骨，結合組織）です。本製品は、コラーゲンに特異的で変性コラーゲン（denatured collagen：gelatin）を認識しないため、50℃で加熱後のサンプルではシグナルが消失します。本製品は可溶性コラーゲンまたは酢酸やペプシンを使用して可溶化したコラーゲンの分析にご使用できます。細胞培養上清や細胞抽出物サンプルの解析に最適で、少なくとも10%までの血清であれば測定に影響を受けません。

可溶性コラーゲン定量アッセイキット（Soluble collagen assay kit）のスタンダードカーブ：0.5-10 µg コラーゲン/well

• 可溶性コラーゲン定量アッセイキット
• トータルコラーゲン定量アッセイキット
• ヒドロキシプロリン定量アッセイキット
• 総タンパク質定量アッセイキット