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細胞骨格（アクチン・チューブリン）やDNAを超解像度で蛍光観察 Spirochrome プローブ（SiR700-Actin / SiR700-Tubulin / SiR700-DNA）

メーカー名：Cytoskeleton, Inc.

Spirochrome社が開発した生細胞イメージングプローブは、生細胞内の微小管（SiR-Tubulin）とF-アクチン（SiR-Actin）、DNA（SiR-DNA）を染色する細胞透過性化合物です。

本プローブは Nature Methods で紹介され、Journal of Biological Chemistry では表紙を飾りました。

※SiR700シリーズとSiRシリーズは、蛍光波長が異なります。

使用目的

SiR700シリーズは、遠赤色蛍光色素分子であるシリコンローダミン（SiR：silicon rhodamine）と類似の蛍光色素分子です。
SiR700-actinは、アクチン結合天然物であるジャスプラキノリド（jasplakinolide）、SiR700-tubulinは微小管結合剤ドセタキシル（microtubule-binding drug Docetaxel）、SiR700-DNAはDNA副溝結合ビスベンズイミダゾール（DNA minor groove binder bisbenzimide (Hoechst)）をそれぞれ基盤としており、SiR700-actinは生細胞中のF-actinを、SiR700-tubulinは生細胞中の微小管を、SiR700-DNAは生細胞中のDNAを特異的かつ低バックグラウンドで検出します。そのため遺伝子操作や過剰発現は必要ありません。

また、生細胞の共焦点蛍光イメージングなど広範囲の分野でご使用できます。遠赤色の放出波長のため、細胞に対する光毒性や自家蛍光を最小限に抑えることができます。
さらに、GFPやm-Cherryといった蛍光タンパク質とも併せてご使用可能です。イメージングの際は、Cy5フィルターセットで検出します。

特長

細胞透過性
光安定的
超解像度
遠赤フルオロフォア
蛍光性
非細胞傷害性

各プローブの特性

**SiR700-actin（アクチン染色プローブ：CY-SC013）**
λ_abs	689 nm
λ_Em	716 nm
ε_max	1.0·10⁵ mol^-1·cm^-1
MW	1265.6 g/mol
MF	C₇₃H₈₈N₈O₁₀Si

**SiR700-tubulin（チューブリン染色プローブ：CY-SC014）**
λ_abs	689 nm
λ_Em	716 nm
ε_{689 nm}	1.0·10⁵ mol^-1·cm^-1
MW	1327.6 g/mol
MF	C₇₅H₈₆N₄O₁₆Si

**SiR700-DNA（DNA染色プローブ：CY-SC015）**
λ_abs	689 nm
λ_Em	716 nm
ε_max	1.0·10⁵ mol^-1·cm^-1
MW	974.2 g/mol
MF	C₆₀H₆₅N₉O₄Si

使用例

Images of cells labeled with SiR-probes

Swiss 3T3線維芽細胞の染色
SiR700-actinで染色したSwiss 3T3線維芽細胞の共焦点イメージ。

Swiss 3T3線維芽細胞の染色
SiR700-DNAで染色したSwiss 3T3線維芽細胞像のイメージ。広視野顕微鏡で観察。

線維芽細胞の染色
SiR700-tubulin（赤色）とHoechst（青色）による染色イメージ。

Cytoskeleton Kit（SiR700-Actin / SiR700-Tubulin / SiR700-DNA）

品名	メーカー	品番	包装	希望販売価格
SiR700-Actin Kit	CYT	CY-SC013	1 KIT [35-200 slides]	￥170,000
SiR700-Tubulin Kit	CYT	CY-SC014	1 KIT [35-200 slides]	￥170,000
SiR700-DNA Kit	CYT	CY-SC015	1 KIT [35-200 slides]	￥110,000

参考文献

“Fluorogenic probes for multi-color imaging in living cells.“ Lukinavicius G. et al. 2016. J. Am. Chem. Soc. Doi: 10.1021/jacs.6b04782.
“Fluorogenic probes for live-cell imaging of the cytoskeleton”; G. Lukinavi?ius, L.Reymond, E. D’Este, A. Masharina, F. Göttfert, H. Ta, A. Güther, M. Fournier, S. Rizzo, H. Waldmann, C. Blaukopf, C. Sommer, D. W. Gerlich, H.-D. Arndt, S. W. Hell & K. Johnsson; Nature Methods 11, 731–733, 2014.
“STED Nanoscopy Reveals the Ubiquity of Subcortical Cytoskeleton Periodicity in Living Neurons”; E. D’Este, D. Kamin, F. Göttfert, A. El-Hady, S. W. Hell; Cell Reports , Volume 10 , Issue 8 , 1246 – 1251, 2015.
“A near-infrared fluorophore for live-cell super-resolution microscopy of cellular proteins”; G. Lukinavi?ius, K. Umezawa, N. Olivier, A. Honigmann, G. Yang, T. Plass, V. Mueller, L. Reymond, I. R. Corrêa Jr, Z. Luo, C. Schultz, E. A. Lemke, P. Heppenstall, C. Eggeling, S. Manley & K. Johnsson; Nature Chemistry 5, 132–139, 2013.
“Dynamic actin filaments control the mechanical behavior of the human red blood cell membrane”; D. S. Gokhin, R. B. Nowak, J. A. Khoory, A. de la Piedra, I. C. Ghiran and V. M. Fowler; Mol. Biol. Cell; February 25, 2015.
“A cleavable cytolysin-neuropeptide Y bioconjugate enables specific drug delivery and demonstrates intracellular mode of action”; V. M. Ahrens, K. B. Kostelnik, R. Rennert, D. Böhme, S. Kalkhof, D. Kosel, L. Weber, M. von Bergen and A. G. Beck-Sickinger; J. Control. Release; 209:170-178, 2015.
“Red Si–rhodamine drug conjugates enable imaging in GFP cells”; E. Kim, K. S. Yang, R. J. Giedt and R. Weissleder; Chem. Commun., 50, 4504-4507, 2014.
“A marginal band of microtubules transports and organizes mitochondria in retinal bipolar synaptic terminals”; M. Graffe, D. Zenisek, and J. Taraska; J. Gen Physiol. Vol. 146 No.1: 109-117, 2015.