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全細胞数と CD34 陽性の生存細胞数の比率を正確かつ再現性良く算出できるキットです。
既知数のビーズが含まれたチューブを使用したシングルプラットフォームにより、細胞数を測定します。
サンプル中の死細胞を除去し、非特異的な染色による偽陽性をアイソタイプコントロールによって見分けることが可能です。
特長
- シングルチューブアッセイによって、1 µL あたりの CD34 陽性細胞の比率と絶対数が同時に測定可能です。
- 死細胞と非特異的なバックグラウンドのシグナルを識別可能です。
- 簡単に素早く CD45/CD34 二重陽性細胞を検出します。
構成内容
| 構成品名 | SCK-25T | SCK-50T |
|---|---|---|
バイアル A
|
25 test | 50 test |
バイアル B
|
25 test | 50 test |
| チューブ（Stepcount） | 50 test | 100 test |
| 7-AAD | 50 test | 100 test |
| 10X NH4Cl Lysing Solution | 5 mL | 10 mL |
そのほかに必要な試薬・機器
- 遠心機
- マイクロピペット（5 µL – 2 mL 分取可能なもの）
- 抗凝固剤を含んだ血液収集チューブ
- 0.09% アジ化ナトリウム含有 PBS（0.5％ BSA 添加をおすすめします。）
- バキューム装置
- ボルテックス
- フローサイトメーター（波長 488 nm）
使用サンプル例
全血、骨髄、動員末梢血、臍帯血など
プロトコール
| 1 | サンプルと試薬を調製します。 |  |
|---|---|---|
| 2 | チューブ A にバイアル A（CD45/CD34）と 7-AAD を添加し、チューブ B にバイアル B（CD45/Isotype Control）と 7-AAD を添加します。（ラベリング） |  |
| 3 | 各チューブにサンプルを入れ、暗所下室温で 15 分間または 4℃ で 30 分間インキュベートします。 |  |
| 4 | Lysing Solution を各チューブに添加後、ボルテックスを行い、よく混和してください。その後、暗所下室温で 10 分間インキュベートします。直ちに測定しない場合は冷暗所に保管し、溶血後 1 時間以内に測定します。 |  |
| 5 | A の領域のみを選択し、サイトメーターをセットします。可能な全イベント数を取得します。 |  |
解析例
| ステップ 1： ミクロスフェア（ビーズ）の集団を選択します。 |
 |
| ステップ 2： 生細胞の集団を選択します。（領域 B） |
 |
| ステップ 3： B の集団から CD34 陽性細胞を選択します。 特異的な CD34 細胞としてチューブ A の CD34 陽性細胞を選択します。 非特異的染色を判別するためにチューブ B についても同じゲート内の細胞を選択します。 |
 |
| ステップ 4： CD34 陽性細胞の絶対数を集計します。 CD34 陽性細胞の絶対数 (cells/µL) = (CD34 細胞集団のイベント数／ビーズ領域のイベント数) X (チューブ内の ビーズ数／使用サンプル容量) |
結果 Viable CD34 of total cells = 1.23% or 579 CD34/uL Total CD34 = 1.31% or 653 cells/uL Viable CD45 = 98.65% or 49250 CD45 cells/uL Total CD45 = 98.47% or 49125 cells/uL Viable CD34 of total CD34 = 91.96% Viable CD45 of total CD45 = 95.84% Viable CD34 of viable CD45 = 1.175% |
Stem Cell Kit
| 品名 | メーカー | 品番 | 包装 | 希望販売価格 |
|---|---|---|---|---|
STEM CELL KIT |
ISP | SCK | 50 TEST |
お問い合わせ |
商品は「研究用試薬」です。人や動物の医療用・臨床診断用・食品用としては使用しないように、十分ご注意ください。
※ 表示価格について
- 「造血幹細胞（HSCs）CD34 陽性細胞の定量キット」は、下記のカテゴリーに属しています。
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