記事ID ： 16302

幅広い脱ユビキチン化酵素（DUB）活性アッセイ試薬をご用意 UbiQ Assay

メーカー名：UbiQ Bio BV

DUB活性の機能不全は様々な疾患に関連し、創薬研究における低分子阻害剤の開発に注目されています。

脱ユビキチン化酵素（DUBs）はタンパク質からユビキチン、ユビキチン様タンパク質（Ubls）を取り去るプロテアーゼです。DUBには主に 3つの機能を持っています。

UbおよびUbl前駆タンパク質のプロセシング
ユビキチンシステムを介したシグナル伝達の制御
ユビキチン鎖のリサイクリングや長さの調節

以上のことから、DUBは様々な疾患に関連し、創薬研究における低分子阻害剤の開発に注目されています。
UBQ社では以下のような幅広い脱ユビキチン化酵素（DUB）活性アッセイ試薬をご用意しています。

特長

UBQ社では、下記表で見られるような工業規模のライブラリーを用いたハイスルプットスクリーニング実験の経験が豊富にあります。

表1. HTSで使用したUBQ社のスクリーニング試薬
Completed and ongoing HTS programs in which UbiQ’s FP assay reagents were used for the primary screen (single point at 10 μM), and dose-response experiments of validated hits. All assays showed excellent Z' values (>0.7). After confirmation of the hits with the FP substrate, an orthogonal Ub-Rh110Gly (UbiQ-002) or Ub-like AMC assay was used for validation; the number of hits identified at this stage varied from 0.33−0.14% of the total library. A subset of compounds (in general 0.05% of the total library) is then selected for IC50 determination using the FP assay reagent (10 concentration steps from 0.15 nM−5 μM).
screen#	HTS assay reagent for primary screen and dose-response	orthogonal assay for hit validation	small molecule library size	Z'-value	# of validate hits (%)	# of hits selecte for dose-response (%)
UB-001 (undisclosed)	UbiQ-12 (Ub FP)	UbiQ-002 (Ub-Rh110Gly)	225K	0.7-0.8	293 (0.14%)	99 (0.05%)
UB-001 (undisclosed)	UbiQ-12 (Ub FP)	UbiQ-002 (Ub-Rh110Gly)	310K	0.7-0.8	664 (0.21%)	182 (0.06%)
UB-002 (undisclosed)	UbiQ-12 (Ub FP)	UbiQ-002 (Ub-Rh110Gly)	310K	0.7-0.8	516 (0.17%)	152 (0.05%)
UB-003 (undisclosed)	Ub-like FP reagent class 1	Ub-like AMC reagent	310K	0.7-0.8	1009 (0.33%)	170 (0.05%)
UB-004 (undisclosed)	Ub-like FP reagent class 1	Ub-like AMC reagent	310K	0.7-0.8	ongoing	ongoing
UB-005 (undisclosed)	Ub-like FP reagent class 2	UbiQ-002 (Ub-Rh110Gly)	310K	0.7-0.8	ongoing	ongoing

試薬	品番	品名	品番	品名	品番	品名
種類	アミドベースのDUBアッセイ試薬		イソペプチドベースの蛍光偏光（FP：Fluorescence Polarization） DUBアッセイ試薬
仕様	レポーター分子とアミド結合を介して結合したユビキチン。レポーター分子はDUBによって開裂すると蛍光を発するか、酵素的に活性化されます。		TAMRA標識ペプチドとネイティブなイソペプチド結合を介して結合したUb/Ubl。励起時に非常に大きな偏光 (high mP)を発します。DUBにより開裂すると、蛍光分子はより小さい、回転速度の速いぺプチド (ジペプチド) に共有結合し、その結果、偏光は小さくなります (low mP)。
蛍光種類	Luc、Rh110、AMC		class I FP		class II FP
イメージ図
仕様	AMC: ex/em - 380/460nm Rh110Gly: ex/em - 485/535nm LUC: ex/em - 400/505nm		ネイティブなイソペプチド結合高波長 read-out ex/em - 550/590 nm 多数の工業規模のHTSを提供		ネイティブなイソペプチド結合高波長 read-out ex/em - 550/590 nm 多数の工業規模のHTSを提供基質コンテクストの導入カスタムデザインが可能
	UbiQ-001	Ub-AMC	UbiQ-012	Ub-FP	UbiQ-043	Ub-Ub(1-14)-FP K6 linked
	UbiQ-002	Ub-Rh110Gly	UbiQ-019	NEDD8-FP	UbiQ-044	Ub-Ub(4-17)-FP K11 linked
	UbiQ-036	Ub-Luc	UbiQ-020	SUMO1-FP	UbiQ-045	Ub-Ub(20-33)-FP K27 linked
	UbiQ-126	Ub-Rh110MP	UbiQ-021	SUMO2-FP	UbiQ-046	Ub-Ub(22-35)-FP K29 linked
			UbiQ-022	SUMO3-FP	UbiQ-047	Ub-Ub(26-39)-FP K33 linked
			UbiQ-073	ISG15-FP	UbiQ-048	Ub-Ub(41-54)-FP K48 linked
					UbiQ-049	Ub-Ub(56-69)-FP K63 linked
					UbiQ-029	Ub- FANCD2 -FP
					UbiQ-030	K13 Ub-PTEN(5-21)-FP
					UbiQ-038	Ub-H2AX-FP
					UbiQ-039	Ub-yH2AX -Ser140(PO4)-FP
	■ パネル品番： UbiQ-L03 品名： DUB activity assay - explorer panel 仕様： 4種類の試薬パネル（UbiQ-001、UbiQ-002、UbiQ-012、UbiQ-036）

■ アミドベースのDUB活性アッセイ試薬

品名	メーカー	品番	包装	希望販売価格
Ub-AMC	UBQ	UBIQ-001	100 UG	￥101,000
Ub-Rh110Gly	UBQ	UBIQ-002	100 UG	￥101,000
Ub-aminoluciferin	UBQ	UBIQ-036	100 UG	￥101,000
Ub-aminoluciferin	UBQ	UBIQ-036	100 UG	￥101,000
Ub-Rh110MP	UBQ	UBIQ-126	50 UG	￥88,000

■ イソペプチドベースの蛍光偏光DUB活性アッセイ試薬

● class I FP

品名	メーカー	品番	包装	希望販売価格
Ub-FP	UBQ	UBIQ-012	50 UG	￥88,000
Nedd8-FP	UBQ	UBIQ-019	25 UG	UBQ社 UBIQ019 50 を参照
SUMO1-FP	UBQ	UBIQ-020	25 UG	UBQ社 UBIQ020 50 を参照
SUMO2-FP	UBQ	UBIQ-021	25 UG	UBQ社 UBIQ021 50 を参照
SUMO3-FP	UBQ	UBIQ-022	1 VIAL	お問い合わせ
ISG15-FP	UBQ	UBIQ-073	25 UG	UBQ社 UBIQ073 50 を参照

● class II FP

品名	メーカー	品番	包装	希望販売価格
Ub-Ub(1-14)-FP K6 linked	UBQ	UBIQ-043	25 UG	￥113,000
Ub-Ub(4-17)-FP K11 linked	UBQ	UBIQ-044	25 UG	￥113,000
Ub-Ub(20-33)-FP K27 linked	UBQ	UBIQ-045	25 UG	￥113,000
Ub-Ub(22-35)-FP K29 linked	UBQ	UBIQ-046	25 UG	￥113,000
Ub-Ub(26-39)-FP K33 linked	UBQ	UBIQ-047	25 UG	￥113,000
Ub-Ub(41-54)-FP K48 linked	UBQ	UBIQ-048	25 UG	￥113,000
Ub-Ub(56-69)-FP K63 linked	UBQ	UBIQ-049	25 UG	￥113,000
Ub- FANCD2 -FP	UBQ	UBIQ-029	25 UG	￥113,000
K13 Ub-PTEN(5-21)-FP	UBQ	UBIQ-030	25 UG	￥113,000
Ub-H2AX-FP	UBQ	UBIQ-038	25 UG	￥113,000
Ub-yH2AX -Ser140(PO4)-FP	UBQ	UBIQ-039	25 UG	￥113,000