| 問題 | 考えられる原因 | 解決法 |
|---|---|---|
| ネガコンlocusでシグナルが出る | 細胞数が多い | 細胞数をtitrationしましょう |
| 超音波処理が弱い |
Input DNAの平均長が500bp位になるように条件を検討しましょう |
|
| 抗体量が多い | 抗体量をtitrationしましょう | |
| PCR増幅が強すぎる | PCRのサイクル数を少なくしましょう | |
| 本当はネガコンlocusでない | 他のネガコンlocusを探しましょう | |
| ポジコンlocusでシグナルが出ない | 細胞数が少ない | 細胞数をtitrationしましょう |
| 固定条件が弱い | 固定時間を長くしましょう | |
| 抗体が不適当 | 抗体を変えてみましょう | |
| 抗体量が少ない | 抗体量をtitrationしましょう | |
| PCRプライマーが不適当 | PCRプライマーの設定を変えましょう | |
| コントロール抗体でのシグナルが弱く、実験系のシグナルとの差がでない | 細胞数が多い | 細胞数をtitrationしましょう |
| 抗体量が多い | 抗体量をtitrationしましょう | |
| PCR増幅が強すぎる | PCRのサイクル数を少なくしましょう | |
| 実験系でシグナルが出ない | 細胞数が少ない | 細胞数をtitrationしましょう |
| 固定条件が弱い | 固定時間を長くしましょう | |
| 抗体が不適当 | 抗体を変えましょう | |
| 抗体量が少ない | 抗体量をtitrationしましょう | |
| PCRプライマーが不適当 | PCRプライマーの設定を変えましょう |
この技術情報は、生田 宏一先生1)、縣 保年先生2)よりご提供いただきました。
1) 京都大学ウイルス研究所 生体応答学研究部門 生体防御研究分野
2) 京都大学大学院医学研究科 先端領域融合医学研究機構
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