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研究用

老化、ビタミンC、肺疾患研究に最適なキットが誕生しました!SMP30・Gluconolactonase ウェスタンブロット・免疫組織染色キット

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SMP30・Gluconolactonase ウェスタンブロット・免疫組織染色キットは、SMP30 (Senescence Marker Protein-30)を免疫組織染色、蛍光染色、ウェスタンブロットで検出するためのキットです。老化、ビタミンC、肺疾患研究に最適です。

背景

SMP30とは

SMP30 (Senescence Marker Protein-30/加齢指標蛋白質30) は、加齢に伴い著しく減少する分子量34kDaのタンパク質としてラットの肝臓から発見されました。加齢変化を示すタンパク質の多くは、ホルモンの影響を受けているため、雌雄で異なる増減傾向を示します。しかし、SMP30はホルモンの影響を受けず、雌雄共に加齢に伴って減少するのが特徴です。また、SMP30は肝臓以外にも腎臓や肺で、同様に加齢に伴い減少します。しかし、その減少パターンは、臓器により異なっています。

最近、SMP30は哺乳類におけるビタミンC合成に必須な酵素Gluconolactonase (GNL)であり、SMP30 (GNL)遺伝子を破壊したノックアウトマウスは体内でビタミンCを合成できず、このマウスをビタミンCの少ないエサで飼育すると、普通のマウスの4倍のスピードで老化が進行することが明らかになりました。また、喫煙による慢性閉塞性肺疾患(COPD)発症リスクを高めることもわかりました。このように、SMP30は老化と非常に密接な関係にあるタンパク質です。

※SMP30, Gluconolactonase (GNL), Regucalcinは全て同一分子です。

構成内容

  • 抗体: ウサギ抗SMP30・GNL抗体 0.1 mL
    *本キットに含まれる抗体はNaN3を含んでいません。
  • 未染標本: SMP30・GNLノックアウトマウス肝臓 2枚、野生型マウス肝臓 2枚
  • 組織抽出液: SMP30・GNLノックアウトマウス肝臓 30 μL(タンパク濃度0.4 mg/mL) 、野生型マウス肝臓 30 μL(タンパク濃度0.4 mg/mL)

プロトコール

使用例

SMP30の免疫組織染色
図1:免疫組織染色
マウス肝臓を300倍希釈ウサギ抗SMP30・GNL抗体で免疫染色した。発色は、ジアミノベンチジン(3,3'-diaminobenzidine)で行った。野生型マウス(SMP30+/+)の肝臓では核と細胞質が染まっている。一方、SMP30・GNLノックアウトマウス(SMP30-/-)では全く染まっていない。

蛍光免疫染色

SMP30の蛍光免疫染色
図2:蛍光免疫染色
マウス初代培養肝実質細胞を200倍希釈ウサギ抗SMP30・GNL抗体で蛍光染色した。肝細胞の核と細胞質が緑色に染まっている。

ウエスタンブロット

SMP30のウェスタンブロット解析
図3:ウェスタンブロッド
各レーン:マウス肝臓抽出物
野生型マウス (SMP30Y/+、SMP30+/+)
SMP30・GNL ノックアウトマウス (SMP30Y/-、SMP30-/-)
ヘテロマウス (SMP30+/-)
1,000 倍希釈ウサギ抗SMP30・GNL 抗体で検出した。
SMP30 (分子量34 kDa) のみ反応する。

参考文献

  1. Ishigami, A. et al., Senescence marker protein-30 knockout mouse liver are highly susceptible to TNF-alpha- and Fas-mediated apoptosis. Am. J. Pathol. 161 1273-1281 (2002)
  2. Ishigami, A. et al., Nuclear localization of senescence marker protein-30 (SMP30) in cultured mouse hepatocytes and its homology to RNA polymerase. Biosci. Biotechnol. Biochem. 67 158-160 (2003)
  3. Kondo, Y. et al., Senescence Marker Protein 30 Functions as Gluconolactonase in L-Ascorbic Acid Biosynthesis and Its Knockout Mice Are Prone to Scurvy. Proc. Nat. Acad. Sci. USA 103 5723-5728 (2006)
  4. Sato, T. et al., Senescence Marker Protein-30 Protects Mice Lungs from Oxidative Stress, Aging and Smoking. Am. J. Respir. Crit. Care Med. 174 530-537 (2006)

SMP30・Gluconolactonase ウェスタンブロット・免疫組織染色キット

品名 メーカー 品番 包装 希望販売価格
SMP30 [Gluconolactonase, GNL] WesternBlot & ImmunoStain Kit, Rat詳細データ SML ROIK01 1 KIT
¥68,000
Anti SMP30 [Regucalcin, Gluconolactonase (GNL)], Rat (Rabbit) Unlabeled詳細データ SML ROI001 0.1 ML
¥30,000

商品は「研究用試薬」です。人や動物の医療用・臨床診断用・食品用としては使用しないように、十分ご注意ください。

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