記事ID ： 1522

カラムで簡単に分離・濃縮！リン酸化タンパク質精製システム PhosphoCruz™

メーカー名：Santa Cruz Biotechnology, Inc.

リン酸化タンパク質精製システム PhosphoCruz™は、目的のタンパク質のリン酸化研究用に、細胞溶解液からリン酸化タンパク質を単離・濃縮するためにデザインされています。

リン酸基を持ったタンパク質は、特異的にレジンに保持され、非リン酸化タンパク質はカラムを通過し非吸着分画に集まります。続いて、レジンに保持されたリン酸化タンパク質をレジンから溶出します。

特長

操作時間は1.5～2時間。
リン酸化タンパク質の研究に最適！
リン酸化濃縮タンパク質の収率は、トータルタンパク質の5-10%です。
カラムにロードする推奨タンパク質量は、2.5-5mg です。

構成内容

IMAC（Immobilized Metal Affinity Chromatography）を利用した、6回分のリン酸化タンパク質濃縮操作に必要な全ての試薬が含まれています。

カラム（リン酸化タンパク質アフィニティーレジンを含む）：6個
2x 結合/洗浄バッファー：100mL
溶出バッファー：30mL
ホスファターゼインヒビター（カクテル1＆2）
マイクロ濃縮器（10,000 MWCO）

プロトコール

事前に、細胞・組織溶解液を準備します。
調製プロトコールはサンタクルズ社プロトコール中のA.サンプル調製をご参照ください。

サンタクルズ社　推奨プロトコール

溶解液のタンパク質濃度を決定
レジンを平衡化
タンパク質を希釈しカラムへ
洗浄操作
溶出操作
マイクロ濃縮器を用いてサンプルを濃縮

使用例

参考文献

1. Ishiguro, K. et al. 2007. Bcl10 is phosphorylated on Ser138 by Ca2+/ calmodulin-dependent protein kinase II. Mol Immunol. 44(8): 2095-2100. 2. Luo, J. et al. 2007. ERK1/2-p90RSK-mediated phosphorylation of Na+/ H+ exchanger isoform 1 A role in ischemic neuronal death. J. Biol. Chem. 282: 28274-28284. 3. Ishiguro, K. et al. 2006. Ca2+/calmodulin-dependent protein kinase II is a modulator of CARMA1-mediated NF-kappaB activation. Mol Cell Biol. 26(14): 5497-5408.