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研究用

ユビキチン化反応酵素群で、Ub-リゾチームを簡単に調製ユビキチン化反応酵素キット

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細胞内ユビキチン・プロテアソーム依存性タンパク質分解システムにおいては、標的タンパク質に付加された鎖状のユビキチンをプロテアソームが認識し、標的タンパク質をATP及びMg2+存在下で速やかに分解します。

このタンパク質分解システムは(1)短寿命タンパク質・構造異常タンパク質の分解、(2)細胞増殖関与因子の分解、(3)物質代謝の律速酵素の分解、(4)情報伝達因子の分解、(5)細胞性免疫の抗原プロセス、といった役割を担っており、癌や感染症等の疾患への関与が幅広く研究されています。

このタンパク質分解システムの研究においては、これまでは放射性同位元素で標識されたユビキチン化リゾチーム等を用いることが一般的でしたが、ホクドー社では誰にでも簡単にUb-リゾチームが調製できるよう、ユビキチン化反応酵素群(E1,E2,E3 mixture)の大量精製を行うことにより、通常のタンパク染色(CBB等)で確認できるほどの高収量なUb-リゾチーム調製を可能にしました。

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構成内容

  • E1,E2,E3 mixture
  • Anti-ubiquitinX(ubiquitin chain)クローン21A8
  • Anti-Lysozyme クローン20G12

実験例

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Fraction II (品番BC15)から文献2に従い、E1,E2,E3mixture(品番BC16)をUb-Sepharose®(品番:BC18)を用いて精製し、リゾチームを基質として反応させUb化を追跡した。反応液から30分おきに15μL取り出し反応をストップさせ12.5% SDSPAGEで展開後、CBB染色した。

SEPHAROSE®はGE Healthcare社の登録商標です。
本商品はSEPHAROSE®クロマトグラフィ担体を使用しております。

参考文献

1.Hershko,A., Heller,H., Elias,S.and Ciechanover,A. J.Biol.Chem.258,8206-8214(1983)
2.Tamura,T., Tanaka,K., Tanahashi,N.Ichihara,A. FEBS.Letters.292,154-158(1991)
※ホクドー社Ubiquitin-Proteasome 研究用試薬シリーズは、独立行政法人産業技術総合研究所ゲノムファクトリー研究部門遺伝子発現工学研究グループとの共同研究成果により、商品化されたものです。

ユビキチン化反応酵素キット

品名 メーカー 品番 包装 希望販売価格
Ubiquitin Conjugation Kit詳細データ HKD BC22 1 KIT
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商品は「研究用試薬」です。人や動物の医療用・臨床診断用・食品用としては使用しないように、十分ご注意ください。

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