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研究用

生細胞中のリソソームの各酵素活性をモニター!MarkerGene™ LysoLive™ リソソーム酵素活性キット

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MarkerGene™ LysoLive™ リソソーム酵素活性キットは、新たに開発した、リソソームの染色試薬(蛍光プローブ)により、生細胞内での標識やリソソームの酵素活性のモニタリングが可能となりました。

背景

リソソームは真核生物が持つ酸性の細胞小器官で、様々な細胞内プロセス(細胞質膜の修復、病原体に対する防御、コレステロールホメオスタシス、骨再形成、代謝、アポトーシス、細胞シグナリング)に関わっていることがわかっています。リソソームの酵素活性の異常は、パーキンソン病、テイ・サックス病、サンドホフ病、クラッべ病、ウォルマン病、ゴーシェ病といった様々な疾患に関わっています。

Marker Gene社のリソソーム酵素活性キットで用いられている標的となる基質は、生細胞染色フォーマットを使ってリソソームへ直接蓄積する標的基を持ち、リソソーム中の低生理 pH で蛍光するために低い pKa 値を持つ蛍光プローブをベースにしています。

MarkerGene(TM) LysoLive(TM) リソソーム酵素活性キット

特長

品番 品名 ターゲット/構成内容
M1376 MarkerGene™ LysoLive™
Lysosomal Phosphatase Assay Kit
ホスファターゼ活性をモニター
[構成内容]
  • LysoLive™ PhosGreen:
    10mM in 1X PBS (10 vials)
  • Lysosomal Staining Standard:
    5mg/mL Acridine Orange in DMSO(1 vial)
M1377 MarkerGene™ LysoLive™
Lysosomal Sulfatase Assay Kit
サルファターゼ活性をモニター
[構成内容]
  • LysoLive™ SulfGreen:
    10mM in DMSO (10 vials).
  • Lysosomal Staining Standard:
    5mg/mL Acridine Orange in DMSO (1 vial).
M1910 MarkerGene™ LysoLive™ 
Lysosomal Metabolic Health Assay Kit
活発な代謝リソソームのみを染色
[構成内容]
  • LysoLive™ EsterGreen :
    10mM solution in DMSO
  • Enzyme Inhibitor :
    30mM chloroquine solution
M2775 MarkerGene™ LysoLive™ 
Lysosomal s-Glucosidase Assay Kit
βグルコシダーゼ活性をモニター
[構成内容]
  • LysoLive™ GlucGreen :
    5 x 10uL (5mM solution)
  • Opti-Klear™ Live Cell Imaging Buffer :
    2 x 30mL
M2776 MarkerGene™ LysoLive™ 
Lysosomal s-Galactosidase Assay Kit
βガラクトシダーゼ活性をモニター
[構成内容]
  • LysoLive™ GalGreen :
    5 x 10uL (15mM solution)
  • Opti-Klear™ Live Cell Imaging Buffer :
    5X solution

仕様

測定波長: EX/EM = 490/520

製品データ

MarkerGene™ LysoLive™ Lysosomal Phosphatase Assay Kit(品番:M1376)

リソソームホスファターゼアッセイの使用例

A:ヒト正常線維芽細胞を200μMのLysoLive™ PhosGreenで一晩培養した。XF68 multi-band filter(Omega Optical)を用いて5秒のシャッタースピードで撮影。
B:ヒト正常線維芽細胞を100mMのスクロースを加えて5日間培養後、200μMのLysoLive™ PhosGreenを加えて一晩培養した。

MarkerGene™ LysoLive™ Lysosomal Sulfatase Assay Kit(品番:M1377)

A:ヒト正常線維芽細胞を200μMのLysoLive™ SulfGreenで一晩培養した。XF68 multi-band filter(Omega Optical)を用いて5秒のシャッタースピードで撮影。
B:ヒト正常線維芽細胞を100mMのスクロースを加えて5日間培養後、200μMのLysoLive™ SulfGreenを加えて一晩培養した。

MarkerGene™ LysoLive™ Lysosomal Metabolic Health Assay Kit(品番:M1910)

品番M1910を使って酵素阻害剤で処理した細胞をラベリング

品番 M1910 を使って酵素阻害剤で処理した細胞をラベリング
ヒト正常線維芽細胞を 300μM の酵素阻害剤で一晩培養後、100μM のLysoLive™ EsterGreen を加えて2時間培養した。

MarkerGene™ LysoLive™ Lysosomal s-Glucosidase Assay Kit(品番:M2775)

品番M2775を使って健常細胞とゴーシェ病疾患患者由来細胞をラベリング

品番 M2775 を使って健常細胞とゴーシェ病疾患患者由来細胞をラベリング
5μM の LysoLive™ 基質を加えて16時間培養した。

MarkerGene™ LysoLive™ Lysosomal s-Galactosidase Assay Kit(品番:M2776)

品番M2776を使って健常細胞とクラッベ病疾患患者由来細胞をラベリング

品番 M2776 を使って健常細胞とクラッベ病疾患患者由来細胞をラベリング
15μMの LysoLive™ GalGreen を加えて16時間培養した。

参考文献

1、Carpenter AE,Jones TR, Lamprecht MR, Clarke C, Kang IH, Friman O, Guertin DA, Chang JH, Lindquist RA, Moffat J, Golland P, Sabatini DM (2006) "CellProfiler: image analysis software for identifying and quantifying cell phenotypes." Genome Biology 7:R100.
2,Karageorgos LE, Isaac EL, Brooks DA, Ravenscroft EM, Davey R, Hopwood JJ, Meikle PJ (1997) "Lysosomal Biogenesis in Lysosomal Storage Disorders" Experimental Cell Research 234, 85-97.
3、Koenig H (1963) "Vital staining of lysosomes by acridine orange." J. Cell Biol 19, 87A.

MarkerGene™ LysoLive™ リソソーム酵素活性キット

品名 メーカー 品番 包装 希望販売価格
MarkerGeneTM LysoLiveTM Lysosomal Phosphatase Assay Kit詳細データ MGT M1376 1 KIT
¥132,000
MarkerGeneTM LysoLiveTM Lysosomal Sulfatase Assay Kit詳細データ MGT M1377 1 KIT
¥132,000
MarkerGeneTM LysoLiveTM Lysosomal Metabolic Health Assay Kit詳細データ MGT M1910 1 KIT
¥71,000
MarkerGeneTM LysoLiveTM Lysosomal β-Glucosidase Assay Kit詳細データ MGT M2775 1 KIT
¥66,000
MarkerGeneTM LysoLiveTM Lysosomal β-Galactosidase Assay Kit詳細データ MGT M2776 1 KIT
¥66,000

商品は「研究用試薬」です。人や動物の医療用・臨床診断用・食品用としては使用しないように、十分ご注意ください。

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