SensoLyte® 520 トロンビンアッセイキットは、トロンビン活性を測定するために最適化されたFRETを利用したキットです。
このキットには、新しい内部消光剤5-FAM/QXL FRET基質(図1)が入っており、トロンビンによって切り離された5-FAMを、Ex/Em=490nm/520nmの蛍光として検出することで、トロンビン活性を検出します。5-FAMは長波長であるため、生体試料と試験化合物の自発蛍光にほとんど干渉されません。
図1 測定原理
トロンビンによる5-FAM/QXL™ 520 FRETペプチドのタンパク質分解がドナーと消光剤間の距離を離し、5-FAMの蛍光が発色する。