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低毒性で高感度！エチジウムブロマイド（EtBr、エチブロ）を代替する新世代蛍光色素 GelRed® & GelGreen® 核酸蛍光染色試薬

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メーカー名：Biotium, Inc.

GelRed® および GelGreen®は、毒性の高いエチジウムブロマイド（EtBr）を代替する新世代のDNA染色蛍光色素です。従来のエチジウムブロマイドやその他代替品よりも、低毒性で高感度、熱安定性に優れた核酸染色試薬です。

使用目的

染色方法	必要な試薬の量	感度^※1	推奨^※2
アガロースゲルに添加（先染め）	1万倍希釈, （50mlのゲルに対して）5 ul	0.625 ng	〇
電気泳動後に染色（後染め）	約3千倍希釈, （50mlの水に対して）15 ul	1.25 ng	◎

※1 Biotium社の1 kb DNA ladderを使用し、500 bpの二本鎖DNAをアガロースゲル電気泳動。GelGreenおよびGelRedで先染めまたは後染め染色を行い、EtBrまたはSYBR Greenフィルターで検出した際の感度。
※2 DNAの移動に対する染料干渉の可能性を排除できるためメーカーでは後染めを推奨しております。

特長

高感度に2本鎖DNA、1本鎖DNA、RNAを検出
エチジウムブルマイド（EtBr）などの従来核酸染色試薬に比べて毒性が低く、安全に利用可能
バックグラウンドが低く、明瞭な染色結果
先染めと後染め両方に対応
SYBER® Green Iに比べて、核酸の移動に影響を与えない
室温で安定

	GelGreen	GelRed
励起波長	250-300 nm 500 nm (より強い吸収ピーク)	約300 nm
蛍光波長	約530 nm	約590 nm
推奨光源	UV光、青色LED	UV光
推奨フィルター	SYBR®フィルター GelStar®フィルター	EtBrフィルター

図1. GelRed®とGelGreen® の励起（Excitation）・蛍光（Emission）スペクトル

吸光度を測定
図2. GelRed®とSYBR® Goldの安定性の比較
GelRed®およびSYBR® Goldを1×濃度になるようTBEバッファーで希釈し、溶液を室温で保管した際の吸光度の経時変化を測定した。
※GelRed™ は、GelRed® に変更になりました。

プロトコル

先染め -アガロースゲルに試薬を添加-

・GelGreen® 10,000XまたはGelRed® 10,000Xをアガロースゲル溶液に1万倍希釈となる量添加し、よく混ぜます。

*60℃以下の溶液に添加してください。
*先染めはポリアクリルアミドゲルには推奨されません。アクリルアミドゲルには後染めプロトコルをご使用ください。

後染め -電気泳動後にゲルを染色-

・ GelGreen® 10,000XまたはGelRed® 10,000Xを水で約 3,300 倍に希釈して、 3X染色溶液を作ります。
・アガロースゲルを3X染色溶液に浸して、室温で穏やかに攪拌しながら30分間反応させます。

*3.5-10%のアクリルアミドを含むポリアクリルアミドゲルの場合：30分～1時間
よりアクリルアミドの含量量が多い場合：1時間以上
*室温・暗所で保存すれば少なくとも2～3回は再利用できます。
*脱染は不要ですが、バックグラウンドが目立つ場合は水で軽く洗浄してください。

使用例

図3. エチジウムブルマイド（EtBr）とGelRed®、SYBR® SafeとGelGreen®の比較
1 kb Plus DNA Ladder（Invitrogen）の2倍連続希釈液を、左から200 ng、100 ng、50 ng、25 ngの量でロード。
EtBrとGelRed®は300nmのトランスイルミネーターを用い、EtBrフィルターで撮影。
SYBR® SafeとGelGreen®は254nmのUVトランスイルミネーターを用い、SYBRフィルターで撮影。

よくあるご質問

【01】 in DMSOとin Waterの違いは何ですか？

溶媒がDMSO（in DMSO）か水（in Water）であるかの違いで、染色性能に差はありません。DMSOは皮膚吸収のリスクがあるため、安全性を考慮してin Waterが開発されました。一方で、既存のプロトコルを変更せずに使用したいというニーズに応えるため、in DMSOも引き続き提供しています。

【02】 GelRed®とGelGreen®どちらを選択すれば良いですか？

GelRed®とGelGreen®の主な違いは、それぞれの励起/蛍光波長です。GelRed®はエチジウムブロマイドに似た赤色蛍光を発し、GelGreen®はSYBR® GreenやSYBR® Safeに似た緑色蛍光を発します。どちらの染色剤も標準的なUVトランスイルミネーターで使用可能です。さらに、GelGreen®は青色光トランスイルミネーター（青色LED）にも対応しており、紫外線によるGelGreenやDNAサンプルへの影響を回避することができます。

【03】 1本鎖DNAやRNAを検出可能ですか？

検出可能です。1本鎖DNAやRNAを検出する場合、GelRed®の方がGelGreen®に比べて5倍感度が高いため、GelRedの使用を推奨します。

GelRed® 核酸蛍光染色試薬

品名	メーカー	品番	包装	希望販売価格
GelRed^(R) Nucleic Acid Gel Stain, 3X in Water	BTI	41001	4 L	￥56,000
GelRed^(R) Nucleic Acid Gel Stain 10.000X in DMSO	BTI	41002	0.5 ML	￥27,000
GelRed^(R) Nucleic Acid Gel Stain, 10, 000X in Water	BTI	41003	0.5 ML	￥28,000

GelGreen® 核酸蛍光染色試薬

品名	メーカー	品番	包装	希望販売価格
GelGreen^(R) Nucleic Acid Gel Stain 10, 000x in DMSO	BTI	41004	0.5 ML	￥25,000
GelGreen^(R) Nucleic Acid Gel Stain, 10, 000X in Water	BTI	41005	0.5 ML	￥27,000

トライアルサイズ

品名	メーカー	品番	包装	希望販売価格
GelRed^(R) Nucleic Acid Gel Stain, 10, 000X in Water (trial size)	BTI	41003-T	0.1 ML	￥7,000
GelGreen^(R) Nucleic Acid Stain, 10, 000X in water (trial size)	BTI	41005-T	0.1 ML	￥6,000

バルクサイズ

下記バルクサイズも承っております。

品名	メーカー	品番	包装	希望販売価格
GelRed^(R) Nucleic Acid Gel Stain, 10, 000X in Water	BTI	41003-1	10 ML	お問い合わせ
GelGreen^(R) Nucleic Acid Gel Stain, 10, 000X in Water	BTI	41005-1	10 ML	お問い合わせ