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AAT Bioquest NEWS 2021年 4月号_9 細胞透過型pHプローブ：高感度＆非破壊的

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メーカー名：AAT Bioquest, Inc. (Former ABD Bioquest, Inc.)

図１．BCFL AM及びBCECF AMの性能比較。
BCFL AM (品番：21190) およびBCECF AM (品番：21202) を用いて作成した標準曲線。4つのデータの平均値をプロット後、4-parameter trendlineを適用させpH6-8の標準曲線を得た。BCFLの方が高感度であった。

核磁気共鳴などの他のIntracellular pH (pHi) 測定法と比較して、蛍光技術と組み合わせたpH感受性プローブは、pHiの変化を空間的、時間的に測定することができます。
さらに、蛍光pHプローブは感度が高く、細胞を破壊せず、取り扱いも簡便です。

広く使われている蛍光pHセンサーであるBCECF AM (品番：21202) は，そのpH依存性の二重励起プロファイルにより、pHをレシオメトリックに測定することができます。
しかし残念ながら、BCECF AMは細胞への定着性が悪く、また3つの異性体が混ざり合っており、その比率がロットによって異なることから、再現性のないpHi測定になる可能性がありました。

幸いなことに、BCECF AMの欠点を克服した優れた上位互換品 (BCFL AM、品番：21190) があり、低変動性であることから長期的なpHiの追跡を必要とする実験に使用されています。

上記のようにAAT Bioquest社の最新の蛍光pHセンサーは、pHiの測定を非常に簡便で正確なものにします。

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図2．フローサイトメトリー解析例。
BCFL AM (品番：21190) とインキュベートしたHL-60細胞を使用した。Spexyte™ Intracellular pH Calibration Buffer Kit (品番：21235) を用いて、細胞内のpHをpH4.5（緑の部分）とpH8.5（赤の部分）にそれぞれクランプした。染色されていない細胞は青色で表されている。

商品情報

品名	メーカー	品番	包装	希望販売価格
BCECF, AM	ABD	21202	1 MG	￥36,000
RatioWorks^TM BCFL, AM Superior replacement for BCECF	ABD	21190	1 MG	￥36,000
CytoFix^TM BCECF, AM Optimized for long term cellular pH tracking	ABD	21200	1 MG	￥68,000
Spexyte^TM Intracellular pH Calibration Buffer Kit	ABD	21235	1 KIT [100 Tests]	￥48,000