
図1.XdUによる増殖細胞の検出
HeLa 細胞を、Bucculite™ XdU Cell Proliferation キットGreen(上)またはDeep Red(下)を使用して処理した。サンプルはHoechst® 33342(青)で染色した。画像は蛍光顕微鏡で取得した。
5-Bromo-2-deoxyuridine (BrdU)は、細胞周期の S期の細胞でDNAを組み込まれるチミジン類似体です。これらのヌクレオシド類似体がDNAに取り込まれると、細胞周期および増殖マーカーとして機能し、BrdU抗体を用いて検出することで、活発に増殖している細胞を特定することができます。
しかし、BrdUは突然変異を起こす可能性があるため、取り扱い方が非常に難しく、慎重な処理が必要です。
AAT Bioquest社のBucculite™ XdU Cell Proliferation Assayは、クリックケミストリーベースの細胞増殖マーカーです。従来の細胞増殖アッセイとは異なり、本製品は新生DNAの定量を放射能や抗体ではなく、アルキン含有チミジンアナログ、XdUの独自の混合物を使用し、S期の間に新たに合成されたDNAに取り込まれます。取り込まれたXdUはiFluor® 488 azideのようなピコリルアジド部分を持つ蛍光体を
用いた、銅触媒によるアジド-アルキン環化付加反応
(すなわち、クリック反応)により検出されます。