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研究用

高感度に Lysosome を特異的に検出Cell Navigator™ リソソーム染色キット

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Cell Navigator™ リソソーム染色キットは、リソソーム(Lysosome)を高感度かつ特異的に検出することができます。

Cell Navigator Redリソソーム染色キットで染色したU2OS細胞の画像
図1. Cell Navigator™ Redリソソーム染色キットで染色したU2OS細胞の画像

背景

リソソームについて

リソソーム(Lysosome)は、廃棄物や細胞の残骸を分解する酸性加水分解酵素を含有する細胞内小器官です。リソソームは過剰または消耗したオルガネラ、食物粒子、貪食したウイルスや細菌を消化します。リソソームを覆う膜により、消化酵素はpH 4.5の条件下で作用します。リソソームはプロトンポンプとクロライドイオンチャネルを介して細胞質からプロトンを汲み上げることで、このpH勾配を維持しています

使用目的

Cell Navigator™蛍光イメージングキットは細胞膜、リソソーム、ミトコンドリア、核等といった細胞内小器官を標識する蛍光イメージングツールのセットです。生細胞のコンパートメントを選択的に標識することは、空間・時間的に細胞現象を解析するうえで、強力なツールとなります。この特殊なキットでは、蛍光色素により生細胞のリソソームを標識することができます。

本キットで用いられているリソソーム向性色素であるLysoBrite™ は、恐らくリソソームのpH勾配によりリソソームへ選択的に蓄積されます。このリソソーム向性指示薬は無傷生細胞を容易に透過する疎水性化合物で、細胞に入り込んだ後にリソソームへ捕捉されます。蛍光強度はリソソームへ移行することで著しく上昇します。この特長によりバックグラウンドの染色が大きく抑制されるため、細胞接着、化学走性、多剤耐性、細胞生存率、アポトーシス、細胞毒性といった種々の研究に有用です。この色素は増殖性細胞と非増殖性細胞の両方に適合し、また接着細胞と非接着細胞の両方に使用できます。LysoBrite™ 色素は既存のリソソーム向性色素と比べ、著しく優れています。既存のリソソーム向性色素は数時間しか使用できないのに対し、LysoBrite™ 色素は毒性が非常に少なく1週間まで生細胞内に留まります。LysoBrite™ は定着性があり、数世代の細胞分裂でも残存します。加えて、LysoBrite™ 色素は既存の色素に比べて光安定性が向上しています。

特長

  • 極小の細胞毒性:細胞毒性は観察されず
  • 多様な波長:Ex/Em = 450/505, 542/556, 575/597, 596/619 nm
  • 向上したシグナル強度:既存競合色素の10倍高い強度
  • 極めて高い光安定性:2分間の露光で退色なし
  • 優秀な細胞内保持:HeLa細胞の追跡で5回以上の継代

構成内容

  • LysoBrite™(リソソーム染色蛍光色素)
  • 生細胞染色バッファー

LysoBrite 選択ガイド

  LysoBrite™
Blue
LysoBrite™ VLG26 LysoBrite™
Green
LysoBrite™
Orange
LysoBrite™
Red
DND-99
LysoBrite™
Red
LysoBrite™
Deep Red
LysoBrite™
NIR
Ex/Em (nm) 432/479 405/480 500/509 542/564 573/592 575/595 595/618 634/649
フィルター DAPI Violet FITC TRITC TRITC TRITC Texas Red Cy5
アプリケーション 生細胞におけるリソソームの蛍光イメージング
ターゲット リソソームpH勾配を介してリソソームに選択的に蓄積および標識
生細胞
固定細胞 ×
染色後の固定 × × × × × × ×
多重染色
検出方法 蛍光イメージング、ハイコンテンツイメージング、マイクロプレート蛍光測定、またはフローサイトメトリー
単品品番 22642   22643 22644 22647 22645 22646 22641
キット品番 22655 22651 22656 22657   22658 22659 22652

操作の概要

  1. 細胞の調製
  2. 色素溶液の添加
  3. 37℃で30分間インキュベート
  4. 細胞を洗浄
  5. 蛍光顕微鏡観察

使用例

A: Cell Navigator Redリソソーム染色キット、B: 既存のリソソーム向性色素で染色したHeLa細胞の画像。
図2. A: Cell Navigator™ Redリソソーム染色キット、B: 既存のリソソーム向性色素で染色したHeLa細胞の画像。
シグナルはオリンパス社の蛍光顕微鏡を用いて、露光時間0秒と120秒で比較した。

 

A: Cell Navigator Redリソソーム染色キット(上部)と、B: 既存のリソソーム向性色素(下部)によるHeLa細胞染色画像
図3. A: Cell Navigator™ Redリソソーム染色キット(上部)と、B: 既存のリソソーム向性色素(下部)によるHeLa細胞染色画像。
シグナルは5回の継代ごとにオリンパスの蛍光顕微鏡で測定した。

Cell Navigator™ リソソーム染色キット

品名 メーカー 品番 包装 希望販売価格
Cell NavigatorTM Lysosome Staining Kit *Green Fluorescence with 405 nm Excitation*詳細データ ABD 22651 1 KIT
[500 Tests]
¥41,000
Cell NavigatorTM Lysosome Staining Kit *Blue Fluorescence*詳細データ ABD 22655 1 KIT
[500 Tests]
¥30,000
Cell NavigatorTM Lysosome Staining Kit *Green Fluorescence*詳細データ ABD 22656 1 KIT
[500 Tests]
¥30,000
Cell NavigatorTM Lysosome Staining Kit *Orange Fluorescence*詳細データ ABD 22657 1 KIT
[500 Tests]
¥30,000
Cell NavigatorTM Lysosome Staining Kit *Red Fluorescence*詳細データ ABD 22658 1 KIT
[500 Tests]
¥30,000
Cell NavigatorTM Lysosome Staining Kit *Deep Red Fluorescence*詳細データ ABD 22659 1 KIT
[500 Tests]
¥30,000
Cell NavigatorTM Lysosome Staining Kit *NIR Fluorescence*詳細データ ABD 22652 1 KIT
[500 Tests]
¥41,000

LysoBrite™ 単品

品名 メーカー 品番 包装 希望販売価格
LysoBriteTM NIR詳細データ ABD 22641 500 TEST
¥30,000
LysoBriteTM Blue詳細データ ABD 22642 500 TEST
¥30,000
LysoBriteTM Green詳細データ ABD 22643 500 TEST
¥30,000
LysoBriteTM Orange詳細データ ABD 22644 500 TEST
¥30,000
LysoBriteTM Red詳細データ ABD 22645 500 TEST
¥30,000
LysoBriteTM Red DND-99詳細データ ABD 22647 1 KIT
[500 Tests]
¥32,000
LysoBriteTM Deep Red詳細データ ABD 22646 500 TEST
¥30,000

製品使用文献

  Cell Navigator™ Lysosome Staining Kit

  • Green Fluorescence with 405 nm Excitation(品番:22651)はこちら
  • Blue Fluorescence(品番:22655)はこちら
  • Green Fluorescence(品番:22656)はこちら
  • Orange Fluorescence(品番:22657)はこちら
  • Red Fluorescence(品番:22658)はこちら
  • Deep Red Fluorescence(品番:22659)はこちら

商品は「研究用試薬」です。人や動物の医療用・臨床診断用・食品用としては使用しないように、十分ご注意ください。

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