培地交換なしで、高い細胞傷害活性をもつNK細胞を作製！ AdoptCell® NK　キット

• 遺伝子改変なし、培地交換なしで新次元の活性
• E:T=1:1, 2時間で多くの細胞株をほぼ死滅させられる傷害活性（NK-resistantで知られるRaji細胞含む）
• フラスコ1個あたりおおよそ1〜3×10⁷cells/mL(フラスコは2個付属)

• AdoptCell®-NK-F
• AdoptCell®-NK-M
• AdoptCell®-NK-S
• AdoptCell®-NK-B

【ご用意いただくもの】

• ヒト末梢血またはヒト末梢血単核球
• 正常ヒト血清AB型（推奨品：コージンバイオ, 12181301）
• Ficoll-Paque™ （ヒト末梢血をご使用の場合）
• りん酸緩衝生理食塩水
• CD3陽性細胞除去用試薬
  （推奨品: Dynabeads™ CD3, Invitrogen, 11151D）
  ※ その他の製品をご使用の場合はお問い合わせください。
• 遠沈管（15ml, 50ml）
• 遠心分離機
• 温度・湿度・CO2濃度制御付細胞培養装置
• 薬用保冷庫（4℃）
• 顕微鏡
• 自動液体用微量体積計
• プッシュボタン式液体用微量体積計

• OptiPrep™（ヒト末梢血から無血小板PBMCを分離する場合）

図1：培養例
抗体：使用濃度1μg/mL
PerCP/Cy5.5 anti-human CD3 Antibody (BioLegend, 300430)
PE/Cy7 anti-human CD16 Antibody (BioLegend, 302016)
Alexa Fluor®700 anti-human CD56 Antibody (BioLegend, 318316)
PerCP/Cy5.5 Mouse IgG1, κ Isotype Ctrl Antibody (BioLegend, 400150)
PE/Cy7 Mouse IgG1, κ Isotype Ctrl Antibody (BioLegend, 400126)
Alexa Flour®700 Mouse IgG1, κ Isotype Ctrl Antibody (BioLegend, 400144)
使用機器： LSRFortessa (BD)
解析： FlowJo Ver.10.4

図2：細胞傷害活性
細胞染色
 標的細胞染色： PKH26 (SIGMA, PHK26GL-1KT)
 死細胞染色： 7-AAD
使用機器： LSRFortessa (BD)
解析： FlowJo Ver.10.4

細胞傷害率= (標的細胞死細胞率- 自然死細胞率)/(最大死細胞率- 自然死細胞率)
 自然死細胞率: 標的細胞のみで反応
 最大死細胞率: 標的細胞を10% ホルマリン等で処理

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