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記事ID : 35881
研究用

培地交換なしで、高い細胞傷害活性をもつNK細胞を作製!AdoptCell® NK キット

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メーカー名:コージン バイオ株式会社

特長

  • 遺伝子改変なし、培地交換なしで新次元の活性
  • E:T=1:1, 2時間で多くの細胞株をほぼ死滅させられる傷害活性(NK-resistantで知られるRaji細胞含む)
  • フラスコ1個あたりおおよそ1〜3×107cells/mL(フラスコは2個付属)

AdoptCell(R) NK キット

構成内容

  • AdoptCell®-NK-F
  • AdoptCell®-NK-M
  • AdoptCell®-NK-S
  • AdoptCell®-NK-B

【ご用意いただくもの】

必須:
  • ヒト末梢血またはヒト末梢血単核球
  • 正常ヒト血清AB型(推奨品:コージンバイオ, 12181301)
  • Ficoll-Paque™ (ヒト末梢血をご使用の場合)
  • りん酸緩衝生理食塩水
  • CD3陽性細胞除去用試薬
    (推奨品: Dynabeads™ CD3, Invitrogen, 11151D)
    ※ その他の製品をご使用の場合はお問い合わせください。
  • 遠沈管(15ml, 50ml)
  • 遠心分離機
  • 温度・湿度・CO2濃度制御付細胞培養装置
  • 薬用保冷庫(4℃)
  • 顕微鏡
  • 自動液体用微量体積計
  • プッシュボタン式液体用微量体積計
オプション:
  • OptiPrep™(ヒト末梢血から無血小板PBMCを分離する場合)

製品データ

培養例
図1:培養例
抗体:使用濃度1μg/mL
PerCP/Cy5.5 anti-human CD3 Antibody (BioLegend, 300430)
PE/Cy7 anti-human CD16 Antibody (BioLegend, 302016)
Alexa Fluor®700 anti-human CD56 Antibody (BioLegend, 318316)
PerCP/Cy5.5 Mouse IgG1, κ Isotype Ctrl Antibody (BioLegend, 400150)
PE/Cy7 Mouse IgG1, κ Isotype Ctrl Antibody (BioLegend, 400126)
Alexa Flour®700 Mouse IgG1, κ Isotype Ctrl Antibody (BioLegend, 400144)
使用機器: LSRFortessa (BD)
解析: FlowJo Ver.10.4

細胞傷害活性
図2:細胞傷害活性
細胞染色
標的細胞染色: PKH26 (SIGMA, PHK26GL-1KT)
死細胞染色: 7-AAD
使用機器: LSRFortessa (BD)
解析: FlowJo Ver.10.4
細胞傷害率= (標的細胞死細胞率- 自然死細胞率)/(最大死細胞率- 自然死細胞率)
自然死細胞率: 標的細胞のみで反応
最大死細胞率: 標的細胞を10% ホルマリン等で処理

よくあるご質問

【01】培養後の細胞にT細胞が多く含まれてしまいます。

培養開始時のCD3陽性細胞率を1%未満とするようにご注意ください。 また、成分採血で採取された血液を材料に用いる場合にはCD34陽性細胞も除去することをおすすめします。

【02】マウスに投与するとNK細胞が死滅または失活しているようです。

ヒト血液中での安定性は確認されておりますが、NOGマウスを含むマウス血中では安定性が確認されておりません。腹腔内投与などをお試しください。

AdoptCell® NK キット

品名 メーカー 品番 包装 希望販売価格
AdoptCell(R)-NK Kit 詳細データ KJN 16030400 1 KIT
¥80,000

商品は「研究用試薬」です。人や動物の医療用・臨床診断用・食品用としては使用しないように、十分ご注意ください。

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