記事ID ： 7461

small GTPaseの活性化を簡便かつ効率よく測定 Rac1／Rap1／Ras／Rho Activation キット

メーカー名：Enzo Life Sciences,Inc.

Rac1／Rap1／Ras／Rho Activation キットは、small GTPaseの活性化を簡便・効率よく測定するために有用です。

使用目的

small GTPaseの活性化を簡便かつ効率よくモニターするためのツールです。

本アッセイは各small GTPase結合ドメインとGSTとの融合タンパク質（下表）を使って細胞ライセートから活性化GTPaseをアフィニティー沈殿させます。GST融合タンパク質を細胞ライセートとグルタチオン固定化ディスクとインキュベートします。プルダウンした活性化GTPaseは各抗体を用いてウエスタンブロットで検出します。

構成内容

グルタチオンレジン
SDSサンプルバッファー
溶解／結合／洗浄バッファー
抗体
GST融合タンパク質
100 X GDP
100 X GTP
スピンカップ
回収用チューブ

ラインアップ

品番	small GTPase	GST融合タンパク質
EKS-450	Rac1	GST-Pak-PBDヒトp21-activated kinase 1のp21-binding domain／~35kDa
EKS-455	Rap1	GST-Ra1GDS-RBDヒトRa1GDSのRap1 binding domain／~40kDa
EKS-460	Ras	GST-Raf1-RBDRaf1のRas-binding domain／~42kDa
EKS-465	Rho	GST -Rhotekin –RBDマウスRhotekinのRho -binding domain／~36kDa

プロトコール

Rac1／Rap1／Ras／Rho Activation キットのプロトコール

アプリケーション例

プルダウンアッセイ結果（品番：EKS-450）

図1．プルダウンアッセイ結果（品番：EKS-450）
マウスNIH/3T3細胞ライセートをGTPγSまたはGDPで処理し、Rac1を活性化・不活性化した。

図2．プルダウンアッセイ結果（品番：EKS-455）
マウスNIH/3T3細胞ライセートをGTPγSまたはGDPで処理し、Rap1を活性化・不活性化した。

図3．プルダウンアッセイ結果（品番：EKS-460）
マウスNIH/3T3細胞ライセートをGTPγSまたはGDPで処理し、Rasを活性化・不活性化した。

図4．プルダウンアッセイ結果（品番：EKS-465）
マウスNIH/3T3細胞ライセートをGTPγSまたはGDPで処理し、Rhoを活性化・不活性化した。

Rac1／Rap1／Ras／Rho Activation キット

品名	メーカー	品番	包装	希望販売価格
Rac1 Activation kit	ENZ	ADI-EKS-450	30 TEST	販売終了
Rap1 Activation kit	ENZ	ADI-EKS-455	30 TEST	販売終了
Ras Activation kit	ENZ	ADI-EKS-460	30 TEST	販売終了
Rho Activation kit	ENZ	ADI-EKS-465	30 TEST	販売終了