長いターゲットも正確・確実に増幅できるマスターミックス Bioneer社 AccuPower® ProFi Taq PCR PreMix

AccuPower® ProFi Taq PCR PreMixは、ProFi Taq DNA ポリメラーゼ、反応バッファー、dNTPs、トラッキングダイ、特許取得の安定剤をプレミックスして凍結乾燥したPCRマスターミックスです。ProFi Taq DNA ポリメラーゼはTaq DNA ポリメラーゼを独自に組換えた酵素で、増幅効率および正確性が非常に高いPCRを実現します。どのようなテンプレートDNAにも適用でき、特に約20kb以上の長いゲノムDNAフラグメントの増幅に効果的です。長いテンプレートや、コピー数の少ないターゲットを正確に増幅でき、全てのPCRに高度に適用できます。

AccuPower® PCR PreMix シリーズ

• Long PCR
  ProFi Taq は、約20kbのゲノムDNAフラグメント、最大30kbのラムダDNAなど、長いターゲットの増幅に特に効果的です。
• 簡便
  個々のチューブ内にPCRに必要な試薬を全て含む、凍結乾燥のプレミックスタイプです。
• 再現性
  Bioneer社の厳格な品質管理生産システムにより、再現性の高い試験結果が得られます。
• 便利
  テンプレートとプライマーを加えるだけで反応をスタートできます。
• 安定
  室温で1ヶ月間、冷凍庫で2年間安定です。

• ゲノムDNAからの長範囲増幅
• プライマー伸長
• 増幅困難なテンプレート
• コピー数の少ないターゲット
• 高収量、高感度PCR

• 5' - 3' エキソヌクレアーゼ活性： Yes
• 3' - 5' エキソヌクレアーゼ活性： Yes
• 3' - A オーバーハング： Yes
• PCRサイズ：30kb

図1　PCR増幅効率の他社品との比較
反応条件：95℃5分間→95℃20秒、55℃20秒、72℃30秒を30サイクル（他社品は各社のプロトコールに従った）
ターゲット：ヒトインスリンレセプター遺伝子
レーンM：100bp DNA ラダー
レーン1：10ng ヒトゲノムDNA
レーン2：1ng ヒトゲノムDNA
レーン3：100pg ヒトゲノムDNA
レーン4：10pg ヒトゲノムDNA

図2　PCR増幅効率の他社品との比較
ヒトトータルRNAから合成したcDNAをテンプレートとしてPCR増幅を行った。
反応条件：95℃5分間→95℃20秒、55℃20秒、72℃30秒を33サイクル（他社品は各社のプロトコールに従った）
ターゲット：ヒトGAPH遺伝子
レーンM：100bp DNA ラダー
レーン1：10ng ヒトトータルDNA
レーン2：1ng ヒトトータルDNA
レーン3：100pg ヒトトータルDNA
レーン4：10pg ヒトトータルDNA

図3　長いターゲットのPCR増幅の他社品との比較
反応条件：95℃分間→95℃20秒、65℃20秒、68℃4分間を30サイクル（他社品は各社のプロトコールに従った）
レーンM1：ラムダ/Hind IIIマーカー
レーンM2：1kb DNA ラダー
レーン1：2kb フラグメント（ヒト腫瘍タンパク質p53遺伝子）
レーン2：3kb フラグメント（ヒト腫瘍タンパク質p53遺伝子）
レーン3：4.5kb フラグメント（ヒトDNAクロスリンク修復1A遺伝子）
レーン4：8kb フラグメント（ヒトヘモグロビンイプシロン1遺伝子）

図4　長いターゲットのPCR増幅の他社品との比較
反応条件：95℃分間→95℃20秒、68℃15分間を32サイクル（他社品は各社のプロトコールに従った）
テンプレート：ヒトゲノムDNA
レーンM1：ラムダ/Hind IIIマーカー
レーンM2：1kb DNA ラダー
レーン1：11kb フラグメント
レーン2：13.5kb フラグメント
レーン3：17.6kb フラグメント
レーン4：21.4kb フラグメント

図5　長いターゲットのPCR増幅の他社品との比較
反応条件：95℃分間→95℃20秒、65℃40秒、68℃20分間を32サイクル（他社品は各社のプロトコールに従った）
テンプレート：ラムダDNA
レーンM1：ラムダ/Hind IIIマーカー
レーンM2：1kb DNA ラダー
レーン1：15kb フラグメント
レーン2：20kb フラグメント
レーン3：25kb フラグメント
レーン4：30kb フラグメント

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