Bioneer社のHotStart PCRは、他社のHotStart PCR酵素(化学反応を利用)と異なり、独自の酵素媒介手法を用いるため、最初の変性ステップでポリメラーゼ活性が完全に解放されます。
Top DNAポリメラーゼは、温度が70℃以下ではピロリン酸により完全に活性が阻害されていますが、70℃を超えると、耐熱性のピロホスファターゼによりピロリン酸が加水分解され、DNAポリメラーゼが活性化されます。これにより、反応セットアップ時の非特異的な産物やプライマーダイマーの形成を防ぎ、PCRの特異性を改善します。