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選択用抗生物質：エンドトキシン試験済み滅菌試薬 Blasticidin

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メーカー名：InvivoGen

Blasticidinは、真核細胞と原核細胞の両方に作用する効率的な選択用抗生物質です。BlasticidinはStreptomyces griseochromogenesから単離されたペプチジルヌクレオシド抗生物質で、リボソーム機構においてペプチド結合形成を阻害することにより、タンパク質合成を阻害します。

Blasticidinに対する耐性は、ブラスチシジン-SデアミナーゼをコードするBacillus cereus(bsr)由来のブラスチシジン耐性遺伝子によって付与されます¹。 Blasticidinに対する耐性は、Streptoverticillum sp由来のブラストサイジンSアセチルトランスフェラーゼ遺伝子（bls）²、Apergillus terreus由来のブラストサイジンSデアミナーゼ遺伝子（BSD）³によっても付与されます。

通常、哺乳類細胞は1～10μg/ml、細菌は25～100μg/mlのBlasticidin濃度で感受性を示します。 Blasticidinで誘導される細胞死は急速に起こるので、Blasticidin耐性遺伝子を導入した細胞株を1週間以内に選択することができます。

FAQあります！

仕様

濃度	10 mg/mL
品質管理	各ロット、ロット間差がないことを確認するために徹底的に試験
純度	≥ 95% (HPLC)
エンドトキシンレベル	< 1 EU/mg
物理化学的特性	pH、外観
細胞培養試験	Blasticidin感受性およびBlasticidin耐性の哺乳類細胞株で有効性を評価
微量汚染物質の非細胞毒性	Blasticidin耐性細胞で長期的に影響がないことを確認

ワーキング濃度

哺乳類細胞株に対するBlasticidinのワーキング濃度は、1～10μg/ml、場合によっては30μg/mlまで変化します。はじめの実験では、宿主細胞株を死滅させるのに必要な抗生物質の最適濃度を決定することをおすすめします。

処理後、細胞死は急速に起こり、トランスフェクション後わずか7日でbsrまたはBSD遺伝子を持つプラスミドを導入した細胞を選択することができます。哺乳動物細胞の数例について選択するためのBlasticidinの推奨濃度を以下に示します。

細胞	培地	濃度	文献情報
CHO (Chinese hamster ovarian cells)	DMEM	5-10 μg/ml	1,2
HEK293 (Human embryonic kidney cells)	DMEM	5-15 μg/ml	3,4
HeLa (Human uterine cells)	DMEM	2.5-10 μg/ml	5,6
Neuro2a (Mouse neuroblasts)	DMEM	30 μg/ml	7
THP-1 (Human monocytes)	RPMI	10 μg/ml	8

Blasticidin溶液

品名	メーカー	品番	包装	希望販売価格
Blasticidin (solution)	ING	ANT-BL-05	50 MG [5 x 1 ml]	￥32,000
Blasticidin (solution)	ING	ANT-BL-1	100 MG [10 x 1 ml]	￥46,000
Blasticidin (solution)	ING	ANT-BL-5B	500 MG [50 ml bottle]	￥174,000
Blasticidin (solution)	ING	ANT-BL-5	500 MG [50 x 1 ml]	￥205,000

Blasticidin粉末

品名	メーカー	品番	包装	希望販売価格
Blasticidin (powder)	ING	ANT-BL-10P	1 G	￥294,000

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参考文献

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Khandelia P. et al., 2011. Streamlined platform for short hairpin RNAinterference and transgenesis in cultured mammalian cells. PNAS 108:12799-804.
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製品使用文献

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