がん免疫の薬効を binding/functional/cell proliferation で評価可能 がん免疫の評価受託サービス

BPS Bioscience社では、がん免疫の薬効評価に有用な各種アッセイサービスを提供しています。

特長

• セルフリーの簡便なアッセイにより、安価で短納期
• サンプルと免疫チェックポイント受容体の結合のみを評価

原理

Fig.1 Binding Assay の原理（免疫チェックポイント受容体とリガンドの結合阻害評価系の一例）
免疫チェックポイント受容体でコートされたウェルに、ビオチン標識したリガンドとビオチンに結合するタグを付加したHRP（Strep-HRP）を添加し、HRPの基質を加えて発光シグナルを検出する。①阻害剤を添加していない場合、ウェル上の受容体にリガンドを介して Strep-HRP が結合し、発光シグナルが検出される。②阻害剤を添加すると受容体とリガンドの結合が阻害され、Strep-HRPが結合しないため、検出されるシグナルは低下する。①と比較し、どの程度シグナルが低下したかを調べることで、サンプルの受容体-リガンド間の結合阻害活性を評価する。

データ例

Fig.2
PD-1 と PD-L1 の結合を検出したデータ（左）および PD-1 と PD-L1 の結合を PD-L2 により阻害したデータ（右）。

特長

• 細胞のシグナル伝達を利用した、実際の細胞応答に近い条件でのアッセイ

Fig. 3 Cell Based Assay の原理（cell based assayの一例）
安定発現の PD-1 と NFAT応答性ルシフェラーゼを導入した Jurkat細胞をエフェクター細胞として、PD-L1 または PD-L2 と TCR activator を強制発現する HEK293 を標的細胞としてそれぞれ使用する。
これらの細胞株を共培養すると、標的細胞の TCR activator によりエフェクター細胞の TCR複合体が活性化されルシフェラーゼが発現し、シグナルが得られる。一方で、PD-1 と PD-L1 または PD-L2 が結合すると TCR の活性化が抑制され、ルシフェラーゼの発現とシグナルが抑制される。サンプル添加によりシグナル抑制がどの程度解除されたかを調べることで、サンプルの PD-L1、PD-L2阻害活性を評価する。

データ例

Fig.4　PD-1に対する中和抗体の評価データ
PD-1エフェクター細胞（Jurkat細胞）を抗PD-1中和抗体で処理したのち、PD-L 1と TCR activator を強制発現する HEK293細胞と共培養した。その後、ルシフェラーゼ基質を加えることでシグナルを検出した。

ターゲットリスト

ターゲットによりアッセイ系が異なります。詳細はページ下部の創薬・受託サービス部までお問い合わせください。

がん細胞をはじめとする様々な細胞に対する増殖阻害をalamarBlue®生細胞検出試薬を用いて評価する受託サービスです。

データ例

Fig.5 HER2阻害剤によるSK-BR-3細胞（ヒト乳がん細胞）の増殖阻害
SK-BR3細胞を様々な濃度の Afatinib（左）および Doxorubicin（右）で 72時間処理した。増殖は alamarBlue® 試薬を使用して蛍光検出した。

ターゲットリスト

上記以外にも対応可能な細胞株がございます。
詳細につきましては、当社　創薬・受託サービス部までお問い合わせください。

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