記事ID ： 12831

DNAに含まれるエテノ付加体を定量する競合ELISA アルデヒド誘発DNA損傷測定アッセイ

メーカー名：Cell Biolabs, Inc.

アルデヒドは、リン脂質の酸化による副産物として、脂質ヒドロペルオキシドの分解によって生成し、細胞や組織中に存在しています。また、塩化ビニルやウレタンのような発癌物質への曝露によって生成される場合があります。生成されたアルデヒドは、4種類のエテノDNA付加体を形成してDNAを損傷します。

図1　アルデヒドが誘発するDNA損傷の構造

セルバイオラボ社では、細胞や組織から単離したDNAに含まれる2種類のエテノ付加体（エテノアデノシンとエテノシチジン）を測定できる、アルデヒド誘発DNA損傷アッセイ ELISAキットをご用意しております。

エテノアデノシンとエテノシチジン両方の損傷構造の研究には、ELISAコンボキット（品番：STA-820-C）の使用をご検討ください。

特長

細胞や組織から単離したDNAの使用に適しています
検出限界は、エテノアデノシン 50 nM、エテノシチジン 625 nM です
合計96アッセイを行うことが可能
キットにはスタンダードが含まれています

構成内容

	アルデヒド誘発DNA損傷 ELISAコンボキット (エテノアデノシン／エテノシチジン定量) 品番：STA-820-C	アルデヒド誘発DNA損傷 ELISAキット (エテノアデノシン定量) 品番：STA-820	アルデヒド誘発DNA損傷 ELISAキット (エテノシチジン定量) 品番：STA-821
96ウェルエテノDNAコートプレート	○	○	○
抗エテノアデノシン抗体	○	○	-
抗エテノシチジン抗体	○	-	○
HRP標識二次抗体	○	○	○
アッセイ希釈液	○	○	○
10X 洗浄バッファー	○	○	○
基質溶液	○	○	○
停止液	○	○	○
エテノアデノシンスタンダード	○	○	-
エテノシチジンスタンダード	○	-	○

アッセイ原理

細胞や組織から単離したDNAに含まれるエテノアデノシンまたはエテノシチジンを、競合ELISA法を用いて定量します。エテノDNA付加体形成により損傷したDNAをコートしたマイクロプレート（キット付属）に、サンプルとスタンダードを添加します。一次抗体を添加すると、サンプル中、またはプレート上にコートしたDNA中のエテノ付加体に、競合的に結合します。洗浄した後、二次抗体を添加します。低いシグナルは、一次抗体の大部分がサンプルに結合したことを意味し、サンプル中に高レベルのエテノ付加体が含まれていることを示します。

実験例

図2　エテノアデノシン（左）とエテノシチジン（右）のスタンダードカーブ

OxiSelect™ アルデヒド誘発DNA損傷 ELISAコンボキット (エテノアデノシン／エテノシチジン定量)

エテノアデノシンとエテノシチジンを組み合わせて、最大96アッセイを行うことが可能です。エテノアデノシンとエテノシチジンは、それぞれ別のウェルでアッセイを行いますが、任意のウェルの位置や比率でお使いいただけます。（例：エテノアデノシン：64ウェル／エテノシチジン：32ウェル、または、各48ウェルずつ、など）