記事ID ： 13019

抗酸化酵素活性を迅速に定量 OxiSelect™ スーパーオキシドジスムターゼ（SOD）活性測定アッセイ

メーカー名：Cell Biolabs, Inc.

OxiSelect™ スーパーオキシドジスムターゼアッセイは、キサンチン／キサンチンオキシダーゼ（XOD）システムを用いて抗酸化酵素スーパーオキシドジスムターゼ（SOD）の活性を測定するキットです。

背景

スーパーオキシドジスムターゼ（SOD）とは

スーパーオキシド（O₂^-）や過酸化水素（H₂O₂）などの活性酸素種（ROS）は、すべての生物種の代謝過程で絶え間なく生成されます。正常な生理的条件下では、細胞内のROS生成は、抗酸化酵素や他の酸化還元分子の作用によって相殺されます。しかし、過剰なROSの蓄積は、DNAやタンパク質、脂質の損傷など、細胞の損傷を引き起こします。この潜在的に有害な影響のため、過剰なROSは、種々の抗酸化防御機構によって速やかに細胞から除去される必要があります。

スーパーオキシドジスムターゼ（SOD；Superoxide dismutase）は、スーパーオキシドアニオンを過酸化水素と酸素分子へ不均化する反応を触媒する酵素で、最も重要な抗酸化酵素の一つです。スーパーオキシドジスムターゼ（SOD）酵素は、三つのグループに分類され、それぞれ、細胞質 Cu/Zn-SOD、ミトコンドリア Mn-SOD、細胞外 Ec-SODと呼ばれます。

特長

迅　速： 2 時間以内に測定終了
定量的： SOD スタンダードが付属
多目的：血清、血漿、細胞/ 組織ライセートに適用

構成内容

SOD スタンダード
キサンチン溶液
キサンチンオキシダーゼ溶液
色素溶液
SOD アッセイバッファー

アッセイ原理

スーパーオキシドアニオン（O₂^-）は、キサンチン/キサンチンオキシダーゼ（XOD）システムによって生成され、色素原溶液で検出されます。しかし、スーパーオキシドジスムターゼ（SOD）の存在下では、これらのスーパーオキシドアニオン濃度が低下し、低い比色シグナルを生じます。

図1．アッセイ原理

実験例

図2．OxiSelect™ スーパーオキシドジスムターゼ活性測定キットによるスタンダード曲線

よくある質問 Q&A

【01】このキットは、どんな種にも使用できますか?

はい。CBL社のSOD活性アッセイは、種特異性はなくどんな生物学的タンパク質サンプルでも使用できます。なぜなら、キサンチン/キサンチンオキシダーゼ　方法を用いて酵素活性を測定しており、タンパク質の構造に依存しておらず、種関係なく使用できます。

【02】凍結サンプルで使用することは可能ですか?

抗酸化サンプルは、-80℃で2ヶ月が最長保存可能期間です。しかし、良い結果を得るために新鮮なサンプルの使用をお奨めします。

【03】 CBL社のSuperoxide Dismutase Activity Assayは、全てのフォームのSuperoxide Dismutaseを認識しますか?

SOD酵素は、細胞質Cu/Zu-SOD、ミトコンドリアMn-SOD、細胞外Ec-SODに分類されます。CBL社のOxiSelect Superoxide Dismutase Activity Assay Kitは全てのSODを検出します。

【04】阻害剤を使用する必要はありますか?もしそうならば何を使用していますか?

このキットは、SOD阻害剤のスクリーニングに使用できます。しかしながら、必須ではありません。文献によれば、SODの一般的なインヒビターは、Diethyldithiocarbamateです。

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SOD活性アッセイ

OxiSelect™ スーパーオキシドジスムターゼ（SOD）活性測定アッセイ

品名	メーカー	品番	包装	希望販売価格
OxiSelect^TM Superoxide Dismutase Activity Assay Kit	CBL	STA-340	100 ASSAY	￥156,000
OxiSelect^TM Superoxide Dismutase Activity Assay, Trial Size	CBL	STA-340-T	20 ASSAY	販売終了