記事ID ： 7343

チューブリン重合アッセイキット（蛍光法)

メーカー名：Cytoskeleton, Inc.

チューブリン重合アッセイキットは、チューブリン重合におけるタンパク質や薬剤の効果をワンステップで測定できる蛍光アッセイシステムです。従来の吸収法と比べて、チューブリン量および反応量が少なくてすみ、高いS/N比が得られます。

特長

従来の吸収法と比べて、チューブリン量および反応量が少なくてすみ、高いS/N比が得られます(下表参照)。

アッセイ方法(蛍光法 vs 吸収法)の比較表
項目	吸収アッセイ	蛍光アッセイ
アッセイあたりのチューブリン量	300ug	100ug
反応量	100uL	50uL
S/N比　(signal/noise)	2	4
変動計数(CV)^*	13%	11%
paclitaxel　EC50^**	1uM	1uM
Vinblastine IC50^**	0.6uM	0.6uM
起こりうる問題点	標準アッセイ中のグリセロールが、薬剤またはタンパク質結合に影響を与える可能性有。アッセイ条件は簡単に変えられる。	蛍光レポーターが薬剤またはタンパク質結合に影響を与える可能性有。

*：Duplicateサンプル
**：標準アッセイ条件下において、条件は重合エンハンサーまたはインヒビター用に最適化されうる。

構成内容

チューブリンタンパク質（>99% pure）
バッファー1　（General tubulin buffer with fluorescent reporter）
チューブリングリセロールバッファー
GTP solution
パクリタキセル（positive control）
DMSO
Half area 96-well plate. Black, flat bottom

アプリケーション

抗がん剤のハイスループットスクリーニング
チューブリン特異性や化合物のIC50値を測定する基礎研究用
チューブリン重合活性で有効なタンパク質のスクリーニング
薬理学の授業の補助教材として

参考文献

Bonne, D., Heusele, C., Simon, C., and Pantaloni, D. (1985). 4’, 6-Diamidino-2-phenylindole, a fluorescent probe for tubulin and mictrotubules. J. Biol. Chem. 260, 2819-2825.