プロテインAのコンタミを検出 Protein A 測定ELISAキット

Protein A 測定 ELISA キットは、比色免疫測定法を用いたサンドイッチ ELISA により、Protein A を高感度かつ高い再現性で定量可能な測定キットです。

黄色ブドウ球菌（Staphylcoccus aureus）由来のProtein A は IgG の Fc 領域に高い親和性を示す 42 kDaの細胞壁構成成分で、抗体精製や、一般的な免疫検出・可視化技術に広く利用されています。
一方で、Protein A は抗腫瘍作用や毒性、発がん関連活性などの生物学的作用に関与することから、抗体医薬品の開発においては、抗体溶液中に残存する Protein A を適切に管理することが重要です。

• 高感度
  精製ヒト化モノクローナル抗体溶液中に残存する Protein A を9.01 pg/ml（<1 ppm）から検出可能です。
• 高精度
  天然型および組換え型のProtein Aを検出可能（参照：図1）です。
• 短時間
  3時間以下で実験結果が得られます。
• 抗体溶液中の不純物分析および Protein A変異体の測定に有用です。

• マイクロタイタープレート
• コンジュゲート
• 抗体
• Assay Buffer 13
• Wash Buffer（濃縮液）
• 標準品
• TMB基質
• Stop solution 2

高い検出精度

図1. 各種Protein Aの検出
異4種類のProtein Aを加熱処理後、本キットにより評価した。
得られたOD値は、本キットの標準曲線から算出し、リカバリー（％）は、実測濃度を期待濃度で除して算出した。
グラフデータは、平均値 ± 1 標準偏差（SD）を示す。
A：S. aureus 由来の天然Protein A (Millipore)
B：E. coli 由来の組換えProtein A (Repligen)
C：E. coli 由来の組換えCys-Protein A (GE)
D：E. coli 由来の組換えアルカリ耐性Protein A変異体 (MabSelect SuRe from GE)

高いロット間再現性

図2. ロット間差の評価
過去12年間にわたる12ロットの標準曲線を評価した。
その結果、Enzo社のProtein A ELISAキットでは、キット間におけるロット差はほとんど認められず、高い再現性が確認された。

他社製品との感度比較

図3. Enzo社製品と他社製品のProtein A検出感度比較
4種類のProtein A（S. aureus 由来の天然Protein A、E. coli で作製した組換えProtein A、E. coli で作製した組換えCys-Protein A、および E. coli で作製した組換えアルカリ耐性Protein A変異体(MabSelect SuRe)）を用いて評価した。その結果、Enzo社のProtein A　ELISAキットは、他社製品に比べ3種類のProtein Aに対して、より高い感度を示した。

低濃度をカバーした標準曲線

図4. 標準曲線の測定範囲
Enzo社のProtein A ELISAキットの標準曲線（スタンダードカーブ）は、 他社製品に比べ低濃度領域（15.6 pg/mL）をカバーしています。

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