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ZytoLight® FISH-Tissue Implementation Kit および ZytoLight® FISH-Cytology Implementation Kit は、ZytoLight® FISH プローブを用いて行う蛍光 in situ ハイブリダイゼーション（FISH）に使用できる試薬のセットです。
本キットは、どの ZytoLight® FISH プローブ（別売、キットには含まれません）にでもご使用いただけます。
背景
in situ ハイブリダイゼーション
標識したDNAプローブを用いた in situ ハイブリダイゼーションにより、細胞や組織内の特定の塩基配列を検出することができます。ハイブリダイゼーションの結果、サンプル中に存在する配列と、配列に特異的なDNAプローブが二本鎖を形成します。
二本鎖を形成した蛍光標識プローブは、適切なフィルターを用いて、蛍光顕微鏡により可視化できます。
使用目的
ZytoLight® FISH-Tissue Implementation Kit（品番：Z-2028-5, Z-2028-20）：
ホルマリン固定・パラフィン包埋組織および細胞サンプル用
ZytoLight® FISH-Cytology Implementation Kit（品番：Z-2099-20）：
細胞診サンプル用
構成内容
- Heat Pretreatment Solution Citric
- ペプシン溶液
- 洗浄バッファー SSC
- 25X 洗浄バッファー A
- DAPI/DuraTect-Solution
＜その他 必要な試薬・機器＞
- ZytoLight® FISH プローブ
- 組織(ポジティブコントロール、ネガティブコントロール)
- スライドガラス(正電荷)
- ウォーターバス（37℃、98℃）
- ハイブリダイゼーション用オーブンもしくはホットプレート、湿潤箱
- ピペット（10 µL、25 µL）
- 染色瓶
- タイマー
- 温度計
- エタノール
- キシレン
- 脱イオン水もしくは蒸留水
- カバーガラス（22 mm x 22 mm、24 mm x 60 mm）
- ラバーセメント(品番：E-4005-50/-125 Fixogum Rubber Cement)
- 蛍光顕微鏡
プロトコール
ZytoLight® FISH-Tissue Implementation Kit のプロトコール
（品番：Z-2028-5, Z-2028-20）
2-4 µm のFFPE組織（10% 中性緩衝ホルマリンで固定）切片に最適化されています。脱パラフィンや脱水に用いるキシレン溶液とエタノール溶液は、定期的に交換してください。
1. 前処理
予熱した Heat Pretreatment Solution Citric（キットに付属）中で、98℃で15分間インキュベートする。
5. ラバーセメントで密封
ラバーセメントなどで、カバーガラスを密封する。
2. タンパク質分解
ペプシン溶液（ready-to-use、キットに付属）を添加し、加湿チャンバー内で、37度で約15分間インキュベートする。
6. 変性＆ハイブリダイゼーション
75℃で10分間スライドをインキュベートして変性させ、（多湿環境下で）37℃で一晩ハイブリダイズする。
3. プローブの添加
切片を完全に風乾し、各サンプルに ZytoLight® プローブ 10 µL（別売）をピペットで添加する。
7. 洗浄
ラバーセメントを除去し、1X 洗浄バッファー A（キットに付属）を用いて、37℃で5分間×2回洗浄する。
4. カバーガラスで覆う
気泡が入らないように、カバーガラスでサンプルを覆う。
8. 検出
DAPI/DuraTect™-Solution（キットに付属）30μL をスライドの上にピペットで添加し、サンプルをカバーガラスで覆う。
適切なフィルターセットを用いて検出する。
ZytoLight® FISH-Tissue Implementation Kit
| 品名 | メーカー | 品番 | 包装 | 希望販売価格 |
|---|---|---|---|---|
ZytoLight(R) FISH-Tissue Implementation Kit |
ZYV | Z-2028-5 | 5 TEST |
￥24,000 |
| ZytoLight(R) FISH-Tissue Implementation Kit |
ZYV | Z-2028-20 | 20 TEST |
￥60,000 |
ZytoLight® FISH-Cytology Implementation Kit
| 品名 | メーカー | 品番 | 包装 | 希望販売価格 |
|---|---|---|---|---|
| ZytoLight(R) FISH-Cytology Implementation Kit |
ZYV | Z-2099-20 | 20 TEST |
￥60,000 |
商品は「研究用試薬」です。人や動物の医療用・臨床診断用・食品用としては使用しないように、十分ご注意ください。
※ 表示価格について
- 「ZytoLight® FISH Implementation Kit」は、下記のカテゴリーに属しています。
