ダブルヒットB細胞リンパ腫(DHL)の研究に FlexISH ® BCL2/BCL6 DistinguISH™ Probe

第18番染色体のq21.33部位のBCL2遺伝子と、第3番染色体のq27.3部位のBCL6遺伝子の再編成を同時に区別して検出するキットです。

ダブルヒットB細胞リンパ腫(DHL)とは

BCL2はミトコンドリア膜タンパク質で、アポトーシスを制御する役割を持ち、B細胞で発現しています。BCL6は転写抑制を担い、リンパ球の成長と機能を制御する役割を持ちます。多くの非ホジキンリンパ腫でBCL2とBCL6の再編成がみられ、さらにMYC再編成と同時に起こるケースもあります。このMYCと、BCL2またはBCL6との再編成が同時に起こるものは、ダブルヒットB細胞リンパ腫(DHL)と呼ばれており、予後が難しいことが知られています。まれに、MYC、BCL2、BCL6が同時に再編成を起こしているトリプルヒットB細胞リンパ腫(THL)も存在します。

造血リンパ組織のがんに関するWHO組織分類(2017年第4版改定版）では、DHLとTHLは、MYCと、BCL2と/またはBCL6の再編成が見られる高度B細胞リンパ腫に分類されています。蛍光 in situ ハイブリダイゼーション（FISH）法により、BCL2/BCL6の再編成を検出することで、DHLとTHLの解析ができます。

第18番染色体のq21.33-q22.1部位と、第3番染色体のq27.3-q28部位にハイブリダイズする直接標識された5種類のプローブがミックスされています。

緑色蛍光色素で直接標識したプローブは、BCL2とBCL6の切断点近傍にハイブリダイズし、オレンジ蛍光色素で直接標識したプローブは、BCL2とBCL6の切断点から遠い末端にハイブリダイズします。

青色蛍光色素で直接標識したプローブは、BCL6の切断点近傍と切断点から遠い末端にハイブリダイズします。

（A）

（B）

図1. プローブの概要
（A）ヒト第3番染色体(左）とヒト第18番染色体(右）の模式図。プローブがハイブリダイズする部位を示している。
（B）BCL6 プローブマップ(上）とSPEC BCL2プローブマップ(下）（*縮尺率は正確ではない。）

BCL2とBCL6の再編成が起きていない間期の細胞核では、BCL2に特異的な緑色とオレンジ色の融合シグナルと、BCL6に特異的な緑色とオレンジ色と青色の融合シグナルが、それぞれ2つずつ検出されます。

BCL2の再編成が起きている場合、1つの緑色と1つのオレンジ色のシグナルが離れた状態で検出されます。これらのシグナルは青色シグナルと同じ位置には検出されません。

BCL6の再編成が起きている場合、1つの緑色と1つのオレンジ色のシグナルが離れた状態で検出されます。これらのシグナルは青色シグナルと同じ位置に検出されます。

図2. リンパ腫組織でのプローブの使用例
(左）リンパ腫組織での使用例： 2つの緑色とオレンジ色と青色の融合シグナルと、1つの緑色とオレンジ色の融合シグナルが検出された。そして、緑色とオレンジ色のシグナルが1つずつ離れた状態で検出され、同じ位置に青色シグナルが検出されなかったことから、BCL2の再編成が起きていることを示している。
(右）びまん性大細胞型B細胞リンパ腫(DLBCL)組織での使用例： 緑色とオレンジ色と青色の融合シグナルと、緑色とオレンジ色の融合シグナルが、それぞれ1つずつ検出された。そして、緑色とオレンジ色のシグナルが1つずつ離れた状態で検出され、同じ位置に青色シグナルが検出されたことから、BCL6の再編成が起きていることを示している。さらに、緑色とオレンジ色のシグナルが離れた状態で検出されたことは、BCL2の再編成が起きていることを示している。つまり、BCL2とBCL6の再編成が同時に起きていることが分かる。

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